[发明专利]一种食品中特丁基对苯二酚的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食品中特丁基对苯二酚的检测方法，属于食品检测领域。

背景技术

抗氧化剂通常被人们用于油脂和油炸食品中，是一种来阻止或延缓食品氧化变质、提高食品稳定性和延长食品贮存期的食品添加剂。抗氧化剂按来源分为天然抗氧化剂和人工合成抗氧化剂，其中特丁基对苯二酚(TBHQ)是油脂和油炸食品中常用的一种合成抗氧化剂。但是，有研究发现，过量的TBHQ的使用会损伤动物的肝微粒体部分，因此对于它们的使用很多国家都有一定的限量标准，甚至有些国家至今尚不允在食品中使用TBHQ。所以对这些食品中抗氧化剂的测定是必要的。

目前，已经有很多测定TBHQ的方法，例如分光光度法、气相色谱法、液相色谱法、毛细管胶束电动色谱法、电化学分析法等。尽管上述方法均有其优点，但也存在步骤繁杂、仪器昂贵、使用有毒溶剂等缺点。因此，建立一种简单、成本低及环境友好型并同时TBHQ的方法迫在眉睫。

最近，化学发光分析法由于具有线性范围宽、灵敏度高，仪器简单，并且没有背景光干扰等优点，而被人们广泛运用。鲁米诺是最早也是最常见应用于化学发光中的试剂，鲁米诺-高锰酸钾体系已经被用来检测很多种物质。然而到目前为止，采用鲁米诺-高锰酸钾体系检测TBHQ的相关研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种食品中特丁基对苯二酚的检测方法，克服现有测定方法步骤繁杂、仪器昂贵、使用有毒溶剂、分析成本高、灵敏度不能满足需求、线性范围窄、分析测定时间长等缺点，基于TBHQ对鲁米诺-高锰酸钾体系的抑制作用，提供了一种全新的简单灵敏的检测抗氧化剂的方法。

本发明提供的检测方法，首先利用高效液相色谱的高分离效率对抗氧化剂进行分离，然后柱后流出，再利用TBHQ对化学发光的影响，建立一种简单、灵敏快速测定TBHQ的HPLC-CL方法，本发明方法的测定原理是：当无TBHQ存在时，鲁米诺-高锰酸钾体系产生一个很强的化学发光信号；而当TBHQ存在时，由于其会与反应体系中的氧化剂高锰酸钾发生反应，从而导致化学信号降低，从而实现对抗氧化剂的测定。

本发明所提供的食品中特丁基对苯二酚的检测方法，包括如下步骤：

(1)利用高效液相色谱法对待测食品中的特丁基对苯二酚进行分离；

(2)在流动注射的条件下，步骤(1)的流出液与化学发光试剂进行混合得到一体系，并进行化学发光反应，根据所述体系的相对化学发光强度值，即得到食品中特丁基对苯二酚的浓度；

所述化学发光试剂为鲁米诺-高锰酸钾体系与碱性pH调节剂的混合液：

所述鲁米诺-高锰酸钾体系为鲁米诺与高锰酸钾的水溶液。

上述的检测方法中，所述食品可为食用油；

所述食用油可为棉籽油、花生油和大豆油中至少一种。

上述的检测方法中，所述食品中所述特丁基对苯二酚的浓度可为5×10^-9g/mL～1×10^-5g/mL。

上述的检测方法中，步骤(1)中，所述高效液相色谱法的检测条件如下：

流动相为甲醇与水的混合液，所述甲醇与所述水的体积比可为70：30；

流速可为0.5～1.0mL/min，具体可为1.0mL/min。

上述的检测方法中，步骤(2)中，所述化学发光试剂中，所述碱性pH调节剂为氢氧化钠或碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液；

所述化学发光试剂中，所述鲁米诺的浓度可为0.1～0.8mmol/L，具体可为0.8mL/min，所述高锰酸钾的浓度可为0.01～0.2mmol/L，具体可为0.2mL/min，所述氢氧化钠的浓度可为0.05～0.5mmol/L，具体可为0.5mL/min；

所述化学发光试剂的流速可为1.0～2.95mL/min。

上述的检测方法中，步骤(2)中，按照下述步骤实现对食品中特丁基对苯二酚的浓度的检测：

1)配制至少3种含有特丁基对苯二酚的标准溶液；

2)按照步骤(1)和步骤(2)分别对所述食品标准样品进行处理，得到相应的化学发光强度值，以所述标准样品中特丁基对苯二酚的浓度为横坐标，以与所述标准样品相应的体系的相对化学发光强度值为纵坐标，制作标准曲线；

3)根据步骤(2)中测定的相对化学发光强度值和所述标准曲线，即得到食品中的特丁基对苯二酚的浓度。

上述的检测方法中，所述食品标准样品中所述特丁基对苯二酚的浓度可为5×10^-9～1×10^-5g/mL。