[发明专利]一种流感病毒分离无血清培养基及其用途和制备

权利要求书

1.一种流感病毒分离无血清培养基，其特征在于包括如下成分：

甘氨酸、L-精氨酸盐酸盐、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-胱氨酸盐酸盐、 L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-组氨酸盐酸盐、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L- 赖氨酸盐酸盐、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏 氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、生物素、氯化胆碱、D-泛酸钙、 叶酸、烟酰胺、对氨基苯甲酸、盐酸吡哆醇、盐酸吡哆醛、核黄素、硫 胺素盐酸盐、维生素B12、肌醇、4水硝酸钙、7水硫酸镁、氯化钾、 碳酸氢钠、氯化钠、磷酸氢二钠、葡萄糖、还原型谷胱甘肽、HEPES、 酚红钠盐。

2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于还包括如下成分：

5水硫酸铜、9水硝酸铁、7水硫酸亚铁、无水氯化镁、7水硫酸锌、1 水磷酸二氢钠、丙酮酸钠、腐胺盐酸盐、白蛋白。

3.如权利要求1所述的培养基，其特征在于各成分含量如下,所述含量 单位为mg/L：

甘氨酸0.1-300、L-精氨酸盐酸盐0.1-500、L-天冬酰胺0.05-200、L- 天冬氨酸0.05-200、L-胱氨酸盐酸盐0.1-200、L-谷氨酰胺0.1-500、L- 谷氨酸0.01-200、L-组氨酸盐酸盐0.1-300、L-异亮氨酸0.5-150、L- 亮氨酸0.5-150、L-赖氨酸盐酸盐1-350、L-甲硫氨酸0.1-150、L-苯丙 氨酸0.5-300、L-脯氨酸0.01-100、L-丝氨酸0.01-150、L-苏氨酸 0.1-200、L-色氨酸0.01-50、L-酪氨酸0.05-150、L-缬氨酸0.05-150、 生物素0.001-0.01、氯化胆碱0.01-50、D-泛酸钙0.005-20、叶酸 0.005-30、烟酰胺0.005-30、对氨基苯甲酸0.001-50、盐酸吡哆醇 0.005-50、盐酸吡哆醛0.005-50、核黄素0.001-10、硫胺素盐酸盐 0.01-100、维生素B120.01-75、肌醇0.1-150、4水硝酸钙0.1-200、7 水硫酸镁0.1-150、氯化钾0.5-500、碳酸氢钠1-6000、氯化钠 10-10000、磷酸氢二钠1-500、葡萄糖1-5000、还原型谷胱甘肽 0.001-300、HEPES100-8000、酚红钠盐0.1-200。

4.如权利要求1-3之一所述的培养基，其特征在于各成分含量为,所述 含量单位为mg/L：

5水硫酸铜0.001-0.01、9水硝酸铁0.01-0.1、7水硫酸亚铁0.05-100、 氯化镁0.1-100、7水硫酸锌0.01-100、磷1水酸二氢钠0.1-200、丙酮 酸钠0.1-300、腐胺盐酸盐0.001-0.01、白蛋白1-5000。

5.如权利要求1-4之一所述的培养基，其PH值为7.0-7.6。

6.一种维持MDCK细胞生长，分离流感病毒的方法，其特征在于使用 如权利要求1-4之一所述的培养基培养MDCK。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于病毒复制所使用的细胞为 MDCK细胞或Vero细胞，所述流感病毒为甲型、乙型或丙型流感。

8.一种流感病毒分离无血清培养基的检测方法，其特征在于从如下几 个方面检测1-4之一的细胞培养基：渗透压、内毒素指标、无菌性、支 原体检测。

9.一种流感病毒培养基的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)将权利要求1-4之一所述的培养基，用蒸馏水溶解，

2)调节PH值，

3)用工业滤芯过滤，

4)在氮气保护下分装。