[发明专利]利用基质蛋白变异检测强直性脊柱炎易感性的试剂盒

说明书

本发明属于医疗技术领域，具体为一种利用基质蛋白变异检测强直性脊柱炎易感性的试剂盒。该试剂盒包括特异性扩增MGP基因或转录本的引物，所述的引物扩增出长度为100‑2000bp且含有SEQ ID NO.1中第1001位的扩增产物；还含有与SEQ ID NO.1中第1001位的突变结合的探针以及识别SEQ ID NO.1中第1001位的突变限制性内切酶。本发明可用于早期辅助性诊断强直性脊柱炎，而且可使一些携带者在未发病前就采取合理的预防措施，从而提高携带者的生存期和生存质量，具有重大的应用价值和社会效益。

技术领域

本发明属于医疗设备技术领域，具体涉及一种检测强直性脊柱炎易感性的试剂盒。

背景技术

强直性脊柱炎又名别赫捷列夫氏（VonBechterev）病或马-施二氏（Maritstrumpell）病，是一种慢性、进行性，中轴关节受累的慢性炎症性疾病。主要影响骨盆的骶髂关节、脊柱关节和椎旁组织。主要症状为下腰痛、脊椎僵硬及运动范围受限、X线显示两侧骶髂关节炎(sacroilitis)为其特征。由于该病一般先侵犯骶髂关节，并重点累及脊柱，最终导致脊柱骨性强直，故目前国内外多称之为强直性脊柱炎（AnkglosingSpondytitis，AS）。

强直性脊柱炎有明显的种族性，在不同民族中发病率的差异很大。印第安人发病率最高，北美印第安人发病率为2.7％～6.3％。其次为白种人，白种人中发病率为0.1％～1.4％。黄种人低于白种人，我国约为0.3％。而黑人发病率最低，约为白人的1/4，在非洲仅为0.2％。

强直性脊柱炎好发于20至40岁的成年人，尤其是20～30岁的青年男性。

强直性脊柱炎呈常染色体显性遗传,有明显的家族遗传倾向,遗传因素>90％。据调查，强直性脊柱炎病人亲属发病率比一般人高一倍左右，同胞复发风险比为82.90％以上的AS病人具有HLA-B27阳性，在正常人群中阳性率为8％；子女HLA-B27阳性占50％，发生强直性脊柱炎的占25％。目前基本上已有定论，HLA-B27作为独立的致病基因在AS的发病中起作用。因为在HLA-B27阳性个体中只有1％～5％发展成为AS，提示还有其他基因参与AS的发病。

MGP全称为基质Gla蛋白，这个基因编码的蛋白是分泌型的并且可以阻碍骨头的形成。编码蛋白主要可以在骨头的有机骨质和软骨中发现。目前已经证实这个基因的缺失会造成Keutel综合症。与这个蛋白相关的通路包括软骨骨化通路，PTM- gamma羧化通路，芳基硫酸酯酶活化通路。在GO中对于它的注释为：这个基因和钙离子通道以及骨头的结构构成相关。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种利用基质蛋白变异检测强直性脊柱炎易感性的试剂盒。本发明通过利用基因型对强直性脊柱炎易感性进行检测，为辅助诊断（尤其是早期诊断）强直性脊柱炎和治疗强直性脊柱炎提供基础。

本发明的第一方面，提供一种利用基质蛋白变异对个体的强直性脊柱炎易感性检测的方法，包括步骤：

检测该个体的MGP基因、转录本和/或蛋白，并与正常的MGP基因、转录本和/或蛋白相比较，存在差异就表明该个体患强直性脊柱炎的可能性高于正常人群。

在另一优选例中，所述的方法中检测的是MGP的基因或转录本，并与正常MGP核苷酸序列比较差异。

在另一优选例中，所述的差异是以下的单核苷酸多态性（SNP）：

第1001位G→A；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO.1。

本发明的第二方面，提供一种检测样品是否存在MGP基因的单核苷酸多态性的方法，包括步骤：

（1）用MGP基因特异性引物扩增样品的MGP基因，得到扩增产物；

（2）检测扩增产物中是否存在以下的单核苷酸多态性：