[发明专利]一种水稻花药特异表达启动子OsAnth3及其应用

权利要求书

1.一种水稻花药特异表达启动子OsAnth3在培育转基因水稻中的应用，其特征在于，所述应用包括：将所述水稻花药特异表达启动子OsAnth3连接于载体中待表达的基因序列上游，从而构建重组表达载体；将所述重组表达载体转化到水稻细胞、组织或器官中进行培育，

所述水稻花药特异表达启动子OsAnth3由序列表中SEQ ID No:1所示的DNA序列构成，其中，

序列表中SEQ ID No:1所述序列包括：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括：

利用序列表SEQ ID No.2和3中的引物，以水稻品种日本晴DNA为模板，扩增权利要求1所述的水稻花药特异表达启动子OsAnth3，采用如下扩增程序：95℃预变性5min；95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸2min30s，循环35次；最后72℃延伸10min；

回收PCR扩增的目的片段，将其连接到特定载体，按照冷激法转化大肠杆菌感受态细胞后，使感受态细胞激活，进而将目的片段转入到激活的感受态细胞，然后，经菌落PCR筛选获得阳性克隆，挑取单克隆菌液提质粒，用HindIII和BamHI进行双酶切验证，验证正确的克隆即为所要获得的水稻花药特异表达启动子OsAnth3；

从上面获得的阳性克隆中提取质粒，用HindIII和BamHI进行双酶切，回收所述的水稻花药特异表达启动子OsAnth3；

将所述水稻花药特异表达启动子OsAnth3和另一个特定载体连接，得到所述水稻花药特异表达启动子OsAnth3与该载体上的待表达基因融合的植物表达载体，利用冻融法将所述植物表达载体转入根癌农杆菌；

利用农杆菌介导方法，对水稻种子，采用所获得的转入了植物表达载体的根癌农杆菌进行农杆菌介导的遗传转化，获得相应水稻植株。