[发明专利]鉴定西瓜籽粒大小的InDel分子标记及其引物和应用有效

专利信息
申请号: 201610148861.3 申请日: 2016-03-16
公开(公告)号: CN105713971B 公开(公告)日: 2019-06-18
发明(设计)人: 李娜;王吉明;马双武;尚建立;李楠楠;杨雪 申请(专利权)人: 中国农业科学院郑州果树研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 河南科技通律师事务所 41123 代理人: 张晓辉;韩松
地址: 450009 河南*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 鉴定 西瓜 籽粒 大小 indel 分子 标记 及其 引物 应用
【权利要求书】:

1.一种鉴定西瓜籽粒大小的InDel分子标记,其核苷酸序列为:TAGCAAGAGCGTTACTACTTCAACTAAAAATATCCATTTCATTTTA。

2.一种权利要求1所述InDel分子标记的引物,其特征在于,所述引物的核苷酸序列为:

InDel14_S6F:TGGTTGTTTCTTTTAGGTGGTA;

InDel14_S6R:AGCGATTATGAGCAATTTTA。

3.一种权利要求1所述InDel分子标记的筛选方法,包括以下步骤:

(1)利用大粒母本和小粒父本杂交的F2群体构建高密度的遗传连锁图谱,并对父母本、F1和F2群体的单株进行千粒重表型鉴定;

(2)结合遗传连锁图谱和表型鉴定结果,进行QTL初定位,在6号连锁群鉴定到一个千粒重主效QTL位点;

(3)结合两个亲本的重测序,在QTL区间查找插入缺失片段大于35bp的InDels,为了缩小候选基因的区域,将QTL区域划分为2段,根据位于端点位置的插入缺失开发InDel分子标记,设计对应的InDel引物;

(4)利用对应的InDel引物在父母本、F1筛选多态性,利用多态性引物对F2群体进行基因型鉴定;

(5)把所鉴定的千粒重主效QTL位点视为一个形态学标记,加上InDel分子标记的基因型鉴定结果和鉴定到QTL位点的连锁群上其它SNP标记,利用JoinMap4.0进行图谱构建,分析所鉴定的千粒重主效QTL位点与新开发标记的连锁程度。

4.权利要求1所述InDel分子标记或权利要求2所述引物在西瓜籽粒大小的分子标记辅助选择中的应用。

5.权利要求1所述InDel分子标记在西瓜籽粒大小的分子标记辅助选择中的应用方法,包括如下步骤:

(1)对F2群体和重组自交系群体每个株系利用所述分子标记进行基因型鉴定;

(2) 利用上述(1)中重组自交系群体和F2群体的基因型鉴定结果,根据分子标记的基因型对不同单株进行分类,并利用千粒重表型数据进行鉴定和验证。

6.权利要求1所述InDel分子标记或权利要求2所述引物在西瓜籽粒大小基因图位克隆中的应用。

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