[发明专利]鉴定西瓜籽粒大小的InDel分子标记及其引物和应用有效
| 申请号: | 201610148861.3 | 申请日: | 2016-03-16 |
| 公开(公告)号: | CN105713971B | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
| 发明(设计)人: | 李娜;王吉明;马双武;尚建立;李楠楠;杨雪 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 河南科技通律师事务所 41123 | 代理人: | 张晓辉;韩松 |
| 地址: | 450009 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 鉴定 西瓜 籽粒 大小 indel 分子 标记 及其 引物 应用 | ||
1.一种鉴定西瓜籽粒大小的InDel分子标记,其核苷酸序列为:TAGCAAGAGCGTTACTACTTCAACTAAAAATATCCATTTCATTTTA。
2.一种权利要求1所述InDel分子标记的引物,其特征在于,所述引物的核苷酸序列为:
InDel14_S6F:TGGTTGTTTCTTTTAGGTGGTA;
InDel14_S6R:AGCGATTATGAGCAATTTTA。
3.一种权利要求1所述InDel分子标记的筛选方法,包括以下步骤:
(1)利用大粒母本和小粒父本杂交的F2群体构建高密度的遗传连锁图谱,并对父母本、F1和F2群体的单株进行千粒重表型鉴定;
(2)结合遗传连锁图谱和表型鉴定结果,进行QTL初定位,在6号连锁群鉴定到一个千粒重主效QTL位点;
(3)结合两个亲本的重测序,在QTL区间查找插入缺失片段大于35bp的InDels,为了缩小候选基因的区域,将QTL区域划分为2段,根据位于端点位置的插入缺失开发InDel分子标记,设计对应的InDel引物;
(4)利用对应的InDel引物在父母本、F1筛选多态性,利用多态性引物对F2群体进行基因型鉴定;
(5)把所鉴定的千粒重主效QTL位点视为一个形态学标记,加上InDel分子标记的基因型鉴定结果和鉴定到QTL位点的连锁群上其它SNP标记,利用JoinMap4.0进行图谱构建,分析所鉴定的千粒重主效QTL位点与新开发标记的连锁程度。
4.权利要求1所述InDel分子标记或权利要求2所述引物在西瓜籽粒大小的分子标记辅助选择中的应用。
5.权利要求1所述InDel分子标记在西瓜籽粒大小的分子标记辅助选择中的应用方法,包括如下步骤:
(1)对F2群体和重组自交系群体每个株系利用所述分子标记进行基因型鉴定;
(2) 利用上述(1)中重组自交系群体和F2群体的基因型鉴定结果,根据分子标记的基因型对不同单株进行分类,并利用千粒重表型数据进行鉴定和验证。
6.权利要求1所述InDel分子标记或权利要求2所述引物在西瓜籽粒大小基因图位克隆中的应用。
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