[发明专利]一种乳头瘤病毒嵌合蛋白及其用途

说明书

本发明公开了一种乳头瘤病毒嵌合蛋白及其用途，具体公开了一种乳头瘤病毒嵌合蛋白，其骨架是乳头瘤病毒的L1蛋白或乳头瘤病毒的L1蛋白的突变体，所述的骨架上嵌合至少一个来自人乳头瘤病毒33型L2蛋白或乳头瘤病毒33型L2蛋白突变体的多肽。该乳头瘤病毒嵌合蛋白可用于制备预防乳头瘤病毒感染及感染诱发的疾病的疫苗。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种乳头瘤病毒嵌合蛋白，及由其形成的病毒样颗粒，以及乳头瘤病毒嵌合蛋白或乳头瘤病毒嵌合病毒样颗粒在制备预防乳头瘤病毒感染及感染诱发的疾病的疫苗中的用途。

背景技术

目前已分离鉴定了200多型人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)，分为嗜黏膜组和嗜皮肤组。黏膜组的HPV主要感染泌尿生殖道、肛门肛周及口咽部的黏膜及周围皮肤，诱发各种良恶性病变。根据诱发病变的性质不同，可分为诱发恶性肿瘤的高危型(包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等)；可疑高危型(HPV26、30、53、66、67、69、70、73、82、85等)；尚未确定型(HPV34、42、43、54、71、81、83、97、102、114等)；及诱发疣状增生等良性病变的低危型(HPV6、7、11、13、32、40、42、44、61、62、72、74、81、83、84、86、87、89、90、91、106等)。嗜皮肤组主要感染上述部位之外的皮肤组织，诱发皮肤疣状增生，并与某些皮肤癌的发生密切相关。

高危型HPV感染相关的恶性肿瘤目前已确定的有：宫颈癌、阴道癌、阴唇癌、阴茎癌、肛门肛周癌、口咽癌、扁桃体癌、口腔癌，其中以宫颈癌的危害最大。宫颈癌是世界范围第三高发的妇女恶性肿瘤，年发病约52.7万，其中亚洲地区28.5万；中国的年发病数7.5万。

HPV16是全球范围内的优势流行株，在HPV相关的肿瘤如宫颈癌、肛周癌、阴茎癌、外阴癌等相关癌及癌前病变中的检出率都是最高的。例如，HPV16感染相关的宫颈癌约占中国宫颈癌总数的58.7％，占世界宫颈癌发病总数的53.5％，其余41.3％-46.5％的宫颈癌由其余约19种高危型HPV感染合并引起。目前已经上市了多种以HPV L1蛋白的病毒样颗粒(VLP)为基础的混合性预防疫苗，如葛兰素史克公司的二价苗Cervarix(HPV16/18)，默沙东公司的四价苗Gardasil(HPV6/11/16/18)及九价苗Gardasil 9(HPV6/11/16/18/31/33/35/45/52/58)。由于这类疫苗诱发的免疫保护反应主要是针对疫苗构成型别的，因此这类疫苗多为HPV多价疫苗，如要获得广谱疫苗的预防效果需要继续扩大疫苗的价次。鉴于HPV的型别目前已鉴定了200多型，高危型已鉴定多达20型，因此通过单纯扩大VLP型别种类研发广谱疫苗在经济成本及人体所能承受的最大接种量方面都带来了许多挑战。

病毒次要衣壳蛋白L2可诱发交叉中和抗体，且具有体内交叉保护活性。研究发现，诱发交叉保护活性的中和抗体表位主要分布在L2蛋白的N端多个保守区域，如HPV16L2蛋白的氨基酸(aa.)17-36多肽的免疫血清可高滴度中和HPV16/18，同时还可有效中和HPV5/6/45/52/58(Gambhira R,Karanam B,et al.J.Virol.2007；81(24):13927–13931)，针对HPV16L2aa.17-36的单抗RG-1亦具有交叉中和活性(Gambhira R,Karanam B,etal.J.Virol.2007；81(24):13927–13931)，因此，L2蛋白的与HPV16L2的aa.17-36多肽同源区又被称为RG-1表位。