[发明专利]RIP3抑制剂在制备抗血小板血栓药物中的用途

说明书

本发明公开了RIP3抑制剂在制备抗血小板血栓药物中的用途。具体而言，本发明首次通过实验探究了RIP3在止血和血栓形成过程中的作用，发现RIP3不仅在体外实验中参与血小板功能的调节，而且在体内的止血和血栓形成过程中也发挥重要作用，可以作为抗血栓的新靶点。通过调节血小板致密体颗粒的释放，RIP3选择性地影响了血栓素A2（TXA2）及凝血酶介导的血小板活化，表明RIP3抑制剂（特别是GSK'872）可以参与血小板血栓形成过程，进而抑制血栓形成，可以开发成新型抗血小板血栓药物，极具科研和经济价值。

技术领域

本发明属于抗血栓药物领域，涉及RIP3抑制剂在制备抗血小板血栓药物中的用途。

背景技术

众所周知，血小板在止血和血栓形成过程中举足轻重。一旦血管出现损伤，血小板即可黏附至内皮下的蛋白成分，同时发生活化，从而触发血小板内致密颗粒的释放及血栓素A2（TXA2）的合成。释放出的可溶性血小板激动剂（如二磷酸腺苷（ADP）、凝血酶及TXA2）进一步募集循环中的血小板，并通过结合至血小板表面的G蛋白偶联受体（G Protein-Coupled Receptor，GPCR）使聚集反应更加稳定，从而形成不可逆的血小板血栓，达到凝血、止血的效果。

ADP作为致密颗粒中的重要组分，在低浓度激动剂引起的血小板活化的信号放大效应中起主要介导作用。ADP通过P2Y1及P2Y12受体分别激动Gq及Gi信号通路。P2Y1受体在ADP诱导的血小板活化中起着微弱却至关重要的始动作用，P2Y12受体不但接续并完善由P2Y1起始的血小板聚集，更重要的是，参与其他激动剂（如TXA2、凝血酶等）诱导的血小板聚集。因此，当血小板受到低浓度激动剂的刺激时，ADP的作用尤为重要。

TXA2或凝血酶刺激血小板均可导致ADP自致密颗粒中释放。虽然TXA2通过血栓素A2/前列腺素H2（TP）受体激活血小板，而凝血酶通过蛋白酶活化受体（Protease-ActivatedReceptors，PARs）激活血小板，但是两者均与Gq及G13通路偶联，而致密颗粒的释放恰恰需要Gq及G13通路的活化。从血小板中去除Gq或G13不仅显著抑制了致密颗粒的释放，亦可影响体内初级止血以及动脉血栓的形成。作为稳定的TXA2类似物，U46619可以诱导ADP的二相释放，而磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）的激活对ADP的二相释放同样发挥重要作用。去除PI3K的下游分子Akt1或Akt2可以减弱血小板的活化及致密颗粒的释放。另外，PI3K可经由GPCR结合到G_βγ。由此可见，PI3K-Akt信号通路在GPCR激动剂诱导的血小板释放过程中发挥重要的调节作用。

受体相互作用蛋白激酶（Receptor-Interacting Protein Kinase，RIP）是一类具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的蛋白，包含7个成员（即RIP1-7），其在N末端均含有一段高度同源的激酶结构域（Kinase Domain，KD），并且具有不同的C末端。其中，含有518个氨基酸的RIP3蛋白是RIP激酶家族中分子量最小的蛋白质，其N末端包含的KD对其激酶活性及自身磷酸化均至关重要，而C末端包含的RIP同型相互作用基序（RIP Homotypic InteractionMotif，RHIM）可介导RIP3与其他坏死性凋亡（necroptosis）相关蛋白的相互作用。现有研究大多关注RIP3对细胞凋亡和程序性坏死的调控作用，但其在止血和血栓形成中的地位尚属未知。

发明内容

本发明首次通过实验探究了RIP3在止血和血栓形成过程中的作用，发现RIP3不仅在体外实验中参与血小板的调节，而且在体内的止血和血栓形成过程中也发挥重要作用，可以作为抗血栓的新靶点。通过调节ADP的释放，RIP3选择性地影响了血栓素A2（TXA2）及凝血酶介导的血小板活化，表明RIP3抑制剂可以参与血小板血栓形成过程，进而抑制血栓形成，可以开发成新型抗血栓药物，极具科研和经济价值。因此，本发明提供了RIP3抑制剂在制备抗血小板血栓药物中的用途。