[发明专利]一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法

权利要求书

1.一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）配置pH值为5.8的磷酸盐缓冲液，然后室温下依次加入辣根过氧化物酶液、葡萄糖氧 化酶液、愈创木酚溶液和葡萄糖溶液；

2）当加入葡萄糖后酶促反应开始，此时开始计时，在吸收波长为470nm条件下采用紫外 可见光分光光度计进行时间扫描，获得产物四邻甲氧基连酚的吸光值随时间的变化数据；

3）根据朗伯比尔定律将四邻甲氧基连酚的吸光值换算为浓度，然后以时间为横坐标， 浓度为纵坐标，在excel中作散点图，添加趋势线，趋势线斜率即为四邻甲氧基连酚的生成 速率，该生成速率乘以系数4即得到葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的反应速率，再根据酶活力单 位定义进行换算即得到葡萄糖氧化酶酶活性。

2.如权利要求1所述葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法，其特征在于，酶促反应中，辣根 过氧化物酶的浓度为2.5×10^-5mmol/L；葡萄糖氧化酶的初始浓度为9×10^-6mmol/L，愈创木 酚的初始浓度为3mmol/L；葡萄糖的初始浓度为50mmol/L。