[发明专利]一种枯草芽孢杆菌、菌剂、菌剂的制备方法和菌剂的应用有效
| 申请号: | 201610140513.1 | 申请日: | 2016-03-11 |
| 公开(公告)号: | CN105586298B | 公开(公告)日: | 2019-03-22 |
| 发明(设计)人: | 董维银;史盼盼;李元鑫;郭婧;贾振宇 | 申请(专利权)人: | 山东京青农业科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125 |
| 代理公司: | 潍坊正信致远知识产权代理有限公司 37255 | 代理人: | 石誉虎 |
| 地址: | 262513 山东省潍坊市青州*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 菌剂 制备 方法 应用 | ||
1.一种枯草芽孢杆菌,其特征在于:枯草芽孢杆菌JQ-001,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏时间:2015年11月9日,保藏登记号为CGMCC No.11632。
2.一种枯草芽孢杆菌菌剂,其特征在于:以权利要求1所述的枯草芽孢杆菌JQ-001经种子活化、种子培养、发酵培养后制成的菌剂。
3.如权利要求2所述的枯草芽孢杆菌菌剂,其特征在于:所述菌剂为液体菌剂或固体菌剂。
4.一种权利要求2所述的枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法,具体包括:
a.菌种活化:将低温保存的枯草芽孢杆菌JQ-001菌株接种于固体培养基上,于35-38℃培养34-38h,挑取单菌落转接到斜面培养基上,于35-38℃培养16-24h,用无菌水洗下培养基表面菌体作为接种液;
b.一级种子液制备:按照5%-10%的接种量向种子培养基中接入步骤a制备的接种液,转速200-260rpm,温度35-38℃,摇床培养16-24h,作为一级种子液;
c.二级种子液制备:按照0.5%-3%的接种量向种子培养基中接入步骤b制备的一级种子液,通气量为0.4-1.5vvm,搅拌速度为180-260rpm,培养时间为18-24h,作为二级种子液;
d.发酵培养:按照5%-10%的接种量向发酵培养基中接入步骤c制备的二级种子液,通气量为0.4-1.5vvm,搅拌速度为180rpm-260rpm,培养时间为24h-30h,得到发酵液;
e.将上述发酵液通过水洗和分子筛浓缩,得到枯草芽孢杆菌液体菌剂。
5.如权利要求4所述的枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于:所述步骤b和步骤c中的种子培养基的组成成分及其重量百分比为:葡萄糖1-2%、蛋白胨1-1.5%、酵母粉0.6-1%、牛肉膏0.5-0.7%、氯化钠0.5%,其余为水。
6.如权利要求4所述的枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于:所述步骤d中的发酵培养基的组成成分及其重量百分比为:葡萄糖3-5%、蛋白胨0.5-1.5%、酵母粉0.03-0.08%、蛋白胨0.1-0.3%、豆粕粉0.5-1.5%、硫酸镁0.01-0.05%、硫酸锰0.01-0.05%,其余为水。
7.如权利要求4所述的枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于:将步骤d所述发酵液进行喷雾干燥,进口温度150-200℃,出口温度50-90℃,加入喷雾载体可溶性淀粉,得到枯草芽孢杆菌粉剂。
8.如权利要求7所述的枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于:按照重量百分比,将原料:枯草芽孢杆菌粉剂20-30%、白炭黑10-15%、硅藻土10-20%、十二烷基磺酸钠1-10%、萘磺酸盐D-1002 2-10%、膨润土10-20%和润湿剂W-2001 2-10%混合均匀,然后粉碎至400目以上,得到枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。
9.如权利要求2所述的枯草芽孢杆菌菌剂的应用,其特征在于:所述菌剂在制备防治水稻稻瘟病和马铃薯疮痂病药物中的应用。
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