[发明专利]一种细胞分层共培养的装置及方法

权利要求书

1.一种细胞分层共培养方法，包括以下步骤：

1)通过离心的方法分离待培养细胞，得到不同浮力的细胞；

2)在细胞分层共培养装置中预先加入不含细胞的培养液，使液面不溢过隔板且垂直距离隔板0.5～2cm，进行孵育；

3)在细胞分层共培养装置中加入浮力小的细胞悬液和浮力大的细胞悬液，使细胞分层共培养装置中的液面接触但不溢过隔板，培养24～48h，两种悬液的加入顺序没有限制；

所述步骤1)和步骤2)没有时间顺序限制；

所述细胞分层共培养装置包括培养瓶(1)和设置在培养瓶(1)内的隔板(2)，所述隔板(2)与所述培养瓶(1)侧壁相接，所述隔板(2)平行于培养瓶瓶底(4)；

所述培养瓶侧壁设置有瓶口，所述瓶口与相接隔板的侧壁相对设置，与瓶口临近的隔板侧边缘低于所述瓶口的底边缘(3)且，垂直距离为0～1cm；

所述隔板(2 )上没有孔洞。

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述隔板与培养瓶除瓶口方向的三侧侧壁相接。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述隔板将培养瓶内空间隔为上部的气体交换空间和下部的细胞培养空间，所述细胞培养空间的体积与所述气体交换空间的体积之比为4∶1～1∶1。

4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述隔板的水平长度为培养瓶水平长度的2/3～5/6，所述隔板的厚度为0.3～1cm。

5.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述孵育是在37～39℃、5～6％CO₂培养箱中静置4～6h。

6.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述待培养细胞在加入到细胞分层共培养装置内之前，先分别进行2～5h的预培养。

7.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述细胞分层共培养装置设置有瓶盖(5)，所述瓶盖通过旋转来保证瓶内的通气，移动培养装置时，旋紧瓶盖，进行细胞培养时，旋转瓶盖使瓶内气体与瓶外气体能够流通。