[发明专利]采用模拟移动床色谱纯化抗体

权利要求书

1.一种从样品混合物制备宿主细胞蛋白(HCP)降低的靶蛋白制剂的方法，所述样品混合物包含靶蛋白和至少一种HCP，所述方法包括：

(a)进行所述样品混合物的拉曼光谱分析；

(b)使所述样品混合物接触色谱树脂，使得树脂被装载至其饱和结合容量的约50%-100%；和

(c)收集色谱样品；和

(d)进行所述色谱样品的拉曼光谱分析以鉴定其为HCP减少的靶蛋白制剂。

2.权利要求1的方法，其中色谱树脂选自亲和色谱树脂、离子交换色谱树脂和疏水相互作用色谱树脂。

3.权利要求1的方法，其中靶蛋白选自：酶；肽类激素；多克隆抗体；人单克隆抗体；人源化单克隆抗体；嵌合单克隆抗体；单链抗体；Fab抗体片段；F(ab')2抗体片段；Fd抗体片段；Fv抗体片段；分离的CDRs；双抗体；和免疫粘附素。

4.权利要求1的方法，其中将色谱树脂充填入一系列被包括入口和出口阀的流体导管分隔的流体连接柱，其中流体连接柱的数量选自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12个柱。

5.权利要求1的方法，其中样品混合物与色谱树脂接触以获得选自高达约0.5分钟、高达约1分钟、高达约2分钟、高达约3分钟、高达约4分钟、高达约5分钟、高达约6分钟、高达约7分钟、高达约8分钟、高达约9分钟、高达约10分钟、高达约11分钟和高达约12分钟的保留时间保留时间。

6.权利要求1的方法，其进一步包括在接触样品混合物前平衡色谱树脂和在接触样品混合物后洗涤色谱树脂的步骤，其中平衡和洗涤缓冲液为相同的缓冲液。

7.权利要求1的方法，其进一步包括色谱树脂的洗涤、洗脱和再生步骤，其中此步骤可被计算和编排以维持样品接触色谱树脂的步骤为过程的时间的约20%至约80%。