[发明专利]一种肠粘膜制备肝素钠工艺

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域的一种肠粘膜制备肝素钠工艺。

背景技术

肝素钠是一种由动物结缔组织的肥大细胞产生的粘多糖 , 是一种天然抗凝血物质, 它在抗凝血 , 促进脂蛋白酶释放和补体溶细胞体系等方面具有活性 , 被广泛用于治 疗血栓塞、暴发性流脑、败血症、肾炎、急性心肌梗塞、动脉硬化等疾病 , 还具有澄清血浆脂, 降低胆固醇等作用。在机体内它与蛋白质结合成复合物存在于肥大细胞中, 可被蛋白 酶解离出来，因此，目前的动物小肠内的肝素钠一般都是采用蛋白酶水解工艺制作，但是， 由于简单的水解工艺制得的肝素钠速度慢、提取率低，该技术有待进一步地提升。

发明内容

本发明主要任务是提供一种肠粘膜制备肝素钠工艺

为了解决以上技术问题，本发明的一种肝素钠的蛋白酶水解工艺，主要由蛋白酶 水解蛋白质进行肝素钠的水解，其特征在于：在蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的水解过程 中，同时辅助超声波，且在小肠粘膜处理阶段控制其含盐量为小肠粘膜质量的 2.5-5%。

进一步地，超声波的波长在 25Hz，功率密度 0.5-0.7 W/cm² 的超声波，在酶解的首 尾各介入一次次，每次处理 0.5h。

本发明的优点在于：由于食盐可促进脂肪的分解 , 对蛋白质的分解具有抑制作用，因 此在肝素钠的提取上，不宜过量使用食盐。但是目前普遍存在提取肝素钠超量使用食盐的 现象，主要是因为食盐量的增加会加快肝素钠的提取速度，缺点是原料浪费大、废水污染严 重，由于没有找到合适的即能提高生产效率，又能环保、高效且提高收率的方法，因此，一直 被延续。

本发明主要是采用超声波的介入，用超声波作用于液体介质时除产生空化作用、 热效应、并赋予液体分子动量外 , 还加速传质和传热的速率，对溶质的溶解度及溶解速度 产生的影响，提高肝素钠的收率及弥补本发明盐度较低降低生产效率的缺陷。实现了高收率、高效且绿色环保，减少废水排放的生产方式。

具体实施方式

实施例 1

选取含盐度为 4 度的猪小肠粘膜液 500g，加入 NAOH，调其 pH 值为 9，搅拌升温至 55℃， 保温 30 分钟后，按小肠粘膜：碱性蛋白酶重量比为 500 ：0.1 加入碱性蛋白酶，保温 2 小时， 在加入碱性蛋白酶后，介入超声波，具体为：超声波的波长在25Hz，功率密度0.5-0.7 W/cm² 的超声波，在酶解的首尾各介入一次，每次处理 0.5h。酶解后是常规的树脂吸附、洗脱、醇淀、烘干得收率为 90%, 效价为 105U/mg 的肝素钠，且在该生产中，由于减少了 NaCl 的用量， 其废水量每处理 1T 小肠减少 200 g，实现了高效、高收率、环保的生产目的。

实施例 2

在 1000 升的反应釜中抽含盐度为 3.5 度的 200 付猪小肠粘膜和水，猪小肠和水的重量 比为 3:1，加入 NAOH，调其 pH 值为 9，搅拌升温至 55℃，保温 30 分钟后，按小肠粘膜：碱性蛋 白酶重量比为 500g ：0.1 加入碱性蛋白酶，保温 2 小时，在加入碱性蛋白酶后，介入超声波， 具体为：超声波的波长在25Hz，功率密度0.5 W/cm² 的超声波，在酶解的首尾各介入一次，每 次处理 0.5h。酶解后是常规的树脂吸附、洗脱、醇淀、烘干得收率为 91%、效价为 106U/mg 的 肝素钠，且在该生产中，由于减少了NaCl 的用量，其废水量每处理1T 小肠减少300g，实现了 高效、高收率、环保的生产目的。