[发明专利]一种RHDV的亚单位疫苗

说明书

本发明提供了一种RHDV的亚单位疫苗,具体地本发明人通过广泛而深入的研究，获得一种制备兔出血症病毒VLP颗粒的方法。本发明提供了一种基因工程细胞，所述基因工程细胞为真核细胞，并且所述细胞的基因组中整合有表达兔出血症病毒VP60蛋白的表达盒；或者所述细胞中含有表达载体，所述表达载体含有表达所述兔出血症病毒VP60蛋白的表达盒；并且所述基因工程细胞在胞内表达所述VP60蛋白，且所述VP60蛋白在所述基因工程细胞内部形成病毒样颗粒(VLP)。本发明还提供了由所述的基因工程细胞表达的病毒样颗粒(VLP)。实验结果表明，根据本发明的基因工程细胞和方法能够高效的制备兔出血症病毒VLP颗粒。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及一种RHDV的亚单位疫苗。

背景技术

兔出血症(Rabbit Hemorrhagic Disease,RHD)是由兔出血症病毒(RabbitHemorrhagic Disease Virus,RHDV)引起的兔的一种急性、败血性、高度接触性传染病,以致死性和全身实质器官出血为主要特征。在家兔养殖业中，危害巨大。

病毒样颗粒(Virus Like Particles，VLP)是含有病毒一个或多个结构蛋白的空心颗粒，没有病毒核酸(DNA/RNA)，不能自主复制，其在形态上与真正的病毒粒子相同或相似，可通过与病毒感染一样的途径呈递给免疫细胞，有效地诱导机体的免疫系统产生免疫保护反应。由于VLPs没有感染性，作为免疫原，它可通过和病毒感染一样的途径呈递给免疫细胞，有效地诱导机体的免疫系统产生免疫保护反应，而宿主、病毒和疫苗因素共同决定VLPs产生的机体防护水平。

目前活病毒疫苗的缺陷就是一旦病毒活性恢复，安全性不能保证。同时，灭活病毒疫苗可因灭活过程不完全而导致安全性问题。但VLPs疫苗没有感染性，稳定性好，不易失活，具有广阔的发展前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种RHDV的亚单位疫苗及其应用。

在本发明的第一方面，提供了一种基因工程细胞，所述基因工程细胞为真核细胞，并且所述细胞的基因组中整合有表达兔出血症病毒VP60蛋白的表达盒；或者所述细胞中含有表达载体，所述表达载体含有表达所述兔出血症病毒VP60蛋白的表达盒；

并且所述基因工程细胞在胞内表达所述VP60蛋白，且所述VP60蛋白在所述基因工程细胞内部形成病毒样颗粒(VLP)。

在另一优选例中，所述真核细胞为酵母细胞，优选为毕赤酵母细胞。

在另一优选例中，所述的表达盒包括5'至3'可操作地连接的以下元件：启动子、起始密码子、所述VP60蛋白的ORF序列和终止密码子。

在另一优选例中，所述的起始密码子和所述VP60蛋白的ORF序列直接相连。

在另一优选例中，所述的表达盒不含有分泌表达元件。

在另一优选例中，所述的表达盒不含有分泌肽、引导肽、或信号肽。

在另一优选例中，所述VP60蛋白的基因序列如SEQ ID NO.:1所示。

在另一优选例中，所述表达载体以毕赤酵母pPICX载体为骨架。

本发明的第二方面，提供了一种病毒样颗粒(VLP)，所述VLP由本发明第一方面所述的基因工程细胞表达。

本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括本发明第一方面所述的病毒样颗粒，和药学上可以接受的载体。

在另一优选例中，所述药物组合物包括疫苗组合物。

本发明的第四方面，提供了一种制备VLP的方法，包括步骤：