[发明专利]一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法

权利要求书

1.一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于包括生物酶合成α-熊果苷和水结晶分离纯化α-熊果苷，所述生物酶合成α-熊果苷酶的反应底液的组份按重量百分比为双糖5.0%~15.0%、1,4-对苯二酚0.5%~5.0%、氢氧化钠0.02%~0.08%、辅助剂0.1%~2.0%和余量的纯化水；在上述反应底液中加入5-50g/L的α-熊果苷酶，并在30~50℃下反应得到α-熊果苷初产品溶液；将α-熊果苷初产品溶液通过3~7次水结晶分离纯化得到环境友好的α-熊果苷结晶产品。

2.根据权利要求1所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所述生物酶合成α-熊果苷过程可细化为以下方法：

首先，称取5.0%~15.0%的双糖和1%~2%的辅助剂，加入75~90%的纯化水进行搅拌溶解；然后，加入氢氧化钠调pH值至5.5~7.5；再加入0.5%~5.0%的1,4-对苯二酚，搅拌溶解，得到酶反应底液；最后加入5-50g/L的α-熊果苷酶在30~50℃下反应，得到α-熊果苷初产品溶液。

3.根据权利要求2所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所述的双糖为麦芽糖、乳糖和蔗糖中的一种或几种。

4.根据权利要求2所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所述的辅助剂为偏亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫脲中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所述水结晶分离纯化α-熊果苷包括以下步骤：

（1）将α-熊果苷初产品溶液浓缩，进行低温搅拌结晶，离心得到晶体；

（2）将步骤（1）中得到的晶体加水加热搅拌溶解，得到二次结晶料液，进行低温结晶，离心得到晶体和母液，母液返回步骤（1）中重复利用；

（3）将步骤（2）中得到的晶体加水加热搅拌溶解，得到三次结晶料液，进行低温结晶，离心得到晶体和母液，母液返回步骤（1）中重复利用；

（4）将步骤（3）中得到的晶体加水加热搅拌溶解，得到四次结晶料液，进行低温结晶，离心得到晶体和母液，母液用于步骤（3）中溶解步骤（2）中得到的晶体；

（5）将步骤（4）中得到的晶体加水加热搅拌溶解，得到五次结晶料液，进行低温结晶，离心得到晶体和母液，母液用于步骤（4）中溶解步骤（3）中得到的晶体；

（6）将步骤（5）中得到的晶体加水加热搅拌溶解，得到六次结晶料液，进行低温结晶，离心得到晶体和母液，母液用于步骤（5）中溶解步骤（4）中得到的晶体；

（7）将步骤（6）中得到的晶体加水加热搅拌溶解，得到七次结晶料液，进行低温结晶，离心得到晶体和母液，母液用于步骤（6）中溶解步骤（5）中得到的最终产品的晶体。

6.根据权利要求5所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所得到的α-熊果苷成品的纯度≥99.5%。

7.根据权利要求5所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所述水结晶纯化结晶料液的成分是蔗糖、果糖、α-熊果苷、对苯二酚和葡萄糖中几种的随意混合物。

8.根据权利要求5所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：所述α-熊果苷最终产品的晶体是根据步骤（3）、（4）、（5）、（6）和（7）中任一步骤得到的晶体进行质量分析，合格后进行干燥、粉碎得到最终产品的晶体。

9.根据权利要求5所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：步骤（1）所述的浓缩是指在40~90℃和真空度≤-0.1MPa条件下，浓缩至料液比重为1.0～2.0。

10.根据权利要求5所述的一种利用生物酶反应和水结晶纯化制备环境友好α-熊果苷的方法，其特征在于：步骤（2）所述的低温结晶是指冷却至室温后，用0~20℃冷却水进行冷却循环结晶。