[发明专利]用于膀胱癌非侵入式诊断的分子标志

说明书

技术领域

本发明涉及用于肿瘤诊断的分子标志，特别涉及用于膀胱癌非侵入式诊断的分子标志。

背景技术

在全球范围内，每年有近90万人被诊断为膀胱癌，每年约有25万人死于膀胱癌[1]。

在我国，膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，膀胱癌可分为非肌层浸润性膀胱癌(T_a/T₁期)和肌层浸润性膀胱癌(T₂-T₄期)。早期膀胱癌患者可行经尿道膀胱肿物电切术(Transurethral Resection of Bladder Tumor TURBT),而肌层浸润性膀胱癌患者需行全膀胱切除、尿流改道，手术后严重影响患者生活质量，而且手术之后5年生存率仅为23％-46％[2]。因此，膀胱癌的早发现、早诊断、早治疗是提高肿瘤治疗效果和提高患者生存质量的关键。膀胱镜检查是膀胱癌早发现、早诊断的“金标准”，但膀胱镜检查为有创性检查，并且可能导致泌尿系感染、出血、尿道损伤，并且临床应用受到外科医生经验水平及场地设备等制约，再者，膀胱光镜检查的费用也颇为昂贵，诸多因素造成了膀胱镜检查不利于膀胱癌的早期筛查。因此，寻求无创、便捷、准确的膀胱癌早期诊断和术后检测方法，是研究者不断努力的方向。

通过检测尿液中的瘤标是目前早期膀胱癌无创性诊断的一种研究趋势。目前已经有数种获得美国食品药物管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准能在临床上应用的尿液膀胱肿瘤标记物，包括核基质蛋白22(nuclear matrix protein 22，NMP22)、膀胱肿瘤抗原(Bladder tumor antigen,BTA)、UroVysion、ImmunoCyt^TM CYFRA21-1、UBC test[3,4]。其中NMP22及BTA检测的平均敏感度分别为67％(41％-100％)及68％(51％-100％)、平均特异度分别为79％(43％-95％)及75％(54％-93％)，而其他几种瘤标的敏感度和特异度有待多地区和多中心的进一步研究。这些检测方法的临床应用，可以使得膀胱癌患者减少膀胱镜检查得频率，减少患者的痛苦及医疗费用，但仍然不能完全取代膀胱镜检查。因此，在尿液当中寻找新的检测瘤标是目前膀胱癌无创性诊断的研究热点方向之一，期望能发现诊断准确率更高的瘤标，或者通过新瘤标与某种常用瘤标的联合诊断来提高诊断准确度，从而逐步实现膀胱癌无创诊断的目标。

AIB1(Amplified in breast cancer 1)首先在人类乳腺癌细胞株当中被发现的癌基因，并已经证实了其在前列腺癌、乳腺癌等恶性肿瘤细胞当中扩增与表达，AIB1是多种恶性肿瘤生长、增殖多必须的[5-7]。发明人的前期研究表明，AIB1在膀胱癌组织当中的基因及蛋白表达水平均较正常组织增高，AIB1高表达水平与患者生存时间呈负相关，同时发明人还阐明了AIB1通过AKT信号通路及充当E2F1协调激活因子的作用来促进膀胱肿瘤细胞的增殖，发明人通过利用纳米技术特异抑制ABI1的表达之后，能后明显抑制膀胱癌细胞株的体外生长与及其在免疫缺陷小鼠体内成瘤[8-10]。

EIF5A2(Eukaryotic initiation factor 5A2)基因首先在卵巢癌HT29细胞株中发现[11]。之后研究者相继在卵巢癌、胃癌、肝癌、肺癌及结肠癌等恶性肿瘤中发现EIF5A2基因的扩增及其编码的蛋白异常表达，并且与肿瘤的发生及复发密切相关[12-17]。发明人的前期研究表明，EIF5A2基因在膀胱癌组织当中扩增，其编码的蛋白异常表达，EIF5A2可以充当肿瘤复发及进展的预测因子。发明人发现EIF5A2是患者预后的独立预测因子。发明人之后的研究当中揭示了EIF5A2是通过STAT而促进TGF-B1表达，进而诱导肿瘤细胞的上皮间充质转化化来促进肿瘤细胞的侵袭[18-20]。

发明内容

本发明的目的在于提供一种更为准确的用于膀胱癌诊断的非侵入式分子标志，以及基于该分子标志的诊断试剂盒。

基于前期的研究基础，发明人通过检测膀胱患者及非膀胱癌人群中尿液当中的AIB1及EIF5A2的蛋白表达水平，发现AIB1及EIF5A2能够充当膀胱癌无创性诊断的新瘤标，联合AIB1、EIF5A2及NMP22更能提高膀胱癌的诊断准确度。