[发明专利]一种具有体内抗氧化活性的点柄粘盖牛肝菌子实体多糖及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属食用菌资源开发领域，具体涉及一种具有体内抗氧化活性的点柄粘盖牛肝菌子实体多糖SGPII-b及其制备方法。

背景技术

点柄粘盖牛肝菌[Suillus granulatus(L.:Fr.)O.Kuntce] 又名黄花松茸、栗壳牛肝菌，在真菌分类上属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、牛肝菌科、粘盖牛肝菌属。点柄粘盖牛肝菌是一种食药兼用野生食用菌，是东北地区重要的野生食用菌之一。点柄粘盖牛肝菌味道鲜美，兼具有的抗肿瘤、抗氧化、提高人体免疫力等功效。这些功效来源于多种生理活性物质，如多糖、维生素、矿物质等，其中以多糖成分最为重点。

生物机体内存在多种自由基，大都以活性氧形式存在。可对机体细胞进行攻击，使机体各系统功能出现紊乱进一步伤害体内组织。目前已有很多疾病被认为是自由基过量引起的。如高脂血症、免疫力低下、类风湿性关节炎以及急性呼吸窘迫综合症等。另一方面也被认为是基是促进机体衰老的主要因子。由于，因此能对自由基起清除作用和具有抗氧化活性的物质越来越受到人们的关注。研究已证实许多食用菌多糖具有抗氧化活性，可对各种自由基具有清除作用，能提高抗氧化酶（SOD）、GSH-Px等的活性，从而表现出抗氧化性能。因此天然抗氧化剂——食用菌多糖的研究和开发在医药保健和食品行业具有着宽阔的应用前景。

发明内容

本发明旨在克服现有技术不足，提供一种操作简单，收率高，具有明显体内抗氧化活性的点柄粘盖牛肝菌子实体多糖及其制备方法。

为解决上述技术问题，本发明是这样实现的。

一种具有体内抗氧化活性的点柄粘盖牛肝菌子实体多糖，其特征在于，源自点柄粘盖牛肝菌子实体，呈灰黄色粉末状，分子量为25.2kDa；由鼠李糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖5种单糖组成，按质量份计，其组成比例依次为：1:1.37:5.11:16.15:3.59。

上述具有体内抗氧化活性的点柄粘盖牛肝菌子实体多糖的制备方法，可按如下步骤依次实施。

（1）点柄粘盖牛肝菌子实体经清洗，晾干，粉碎后得提取原料。

（2）向提取原料中加入去离子水后，浸提；离心收集残渣，再重复浸提，合并滤液得到粗提液。

（3）粗提液经旋转蒸发浓缩后，加入无水乙醇，搅拌产生沉淀，静置，离心收集沉淀，沉淀经无水乙醇和乙醚洗涤后得粗多糖CSGP。

（4）粗多糖CSGP溶于去离子水后加入Sevag试剂充分振荡；离心去除蛋白层和氯仿层；水层重复操作至不再出现蛋白层为止，所得水溶液经透析和冷冻干燥得到多糖SGP。

（5）将多糖SGP溶于去离子水中，先后用去离子水、0.5M NaCl和1.5M NaCl溶液进行洗脱分级；收集1.5M NaCl的洗脱液；洗脱液经透析除盐，冷冻干燥得多糖SGPII。

（6）将多糖SGPII溶于去离子水中进行洗脱分级；收集洗脱流出的第二个组分；收集得到的组分经透析除盐、冷冻干燥即得目的产物具有体内抗氧化活性的点柄粘盖牛肝菌子实体多糖SGPII-b。

作为一种优选方案，本发明所述步骤（2）中，向提取原料中加入20～40倍重量去离子水后，80～100℃浸提2～4h。

进一步地，本发明所述步骤（3）中，粗提液经旋转蒸发浓缩后，加入3～5倍体积无水乙醇，边加边缓慢搅拌产生沉淀，2～6℃静置10～20h。

进一步地，本发明所述步骤（1）中，点柄粘盖牛肝菌子实体粉碎至40～100目。

进一步地，本发明所述步骤（2）中，离心收集速度为3000～5000转/分；离心20～30分钟。

进一步地，本发明所述步骤（3）中，离心收集速度为10000～15000转/分；离心20～30分钟。

进一步地，本发明所述步骤（4）中，Sevag试剂由正丁醇和氯仿按体积比1:4～5配制； Sevag试剂的用量按多糖溶液体积的1:4～6加入；离心收集速度为3500～4500转/分；离心10～25分钟。

进一步地，本发明所述步骤（5）中，可采用DEAE-纤维素离子交换柱洗脱分级。

进一步地，本发明所述步骤（6）中，可采用琼脂糖凝胶CL-6B洗脱分级。

点柄粘盖牛肝菌子实体多糖的体内抗氧化实验。