[发明专利]一株海洋细菌Pseudoalteromonas sp SC127及其制备的石莼硫酸鼠李聚糖酶

说明书

本发明的目的是提供了一株海洋细菌Pseudoalteromonas sp SC127及其制备的石莼硫酸鼠李聚糖酶。该菌株保藏编号为CCTCC NO.M 2015422，其具有硫酸鼠李聚糖酶生产能力，可用于寡聚硫酸鼠李聚糖的制备。通过酶的分离纯化，SDS‑PAGE确定该菌株产生的硫酸鼠李聚糖酶的分子量为110.6 kDa。利用本发明的菌株作为硫酸鼠李聚糖酶的生产菌株，具有营养要求简单、产酶活性高、稳定性好、生产周期短、成本低的特点，在工业生产中具有一定的应用价值，为低聚糖的活性研究和开发提供保证。

技术领域

本发明属于海洋微生物技术领域，具体涉及一株海洋细菌PseudoalteromonasspSC127及其制备的石莼硫酸鼠李聚糖酶。

背景技术

硫酸鼠李聚糖是广泛存在于石莼、浒苔、礁膜等绿藻中的一种高分子量的硫酸杂多糖，主要由鼠李糖及鼠李糖硫酸酯组成，另外还含有葡萄糖、木糖、半乳糖、甘露糖、糖醛酸等。研究发现它具有多种生理活性，包括抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、降血糖血脂、免疫调节、抗氧化活性等功效，是一类具有重要生物活性的非常有药用价值的化合物。但因硫酸鼠李聚糖分子量巨大，分子量分布从几万到百万不等，严重影响了它的吸收效率；同时其具有一定的粘性，也大大阻碍了它作为药物的应用。目前，降解硫酸鼠李聚糖的方法主要有化学降解法、物理降解法和酶降解法。较之化学降解法和物理降解法，酶解法具有降解特异性、选择性好，反应过程容易控制，易于得到所需分子量范围的低聚糖产品，产物含量高，功能性强等优势，是降解硫酸鼠李聚糖的最佳方法。

据本发明人通过查阅资料、文献检索所知，国内外关于硫酸鼠李聚糖酶已有一些报道，产硫酸鼠李聚糖酶的菌种主要来源于交替单胞菌属（Alteromonassp.）、Catenovulum属海洋细菌及一些真菌。酶的分子量是酶重要的性质表征，它代表了不同酶蛋白的分子大小，也是描述酶学性质的重要指标。如CN104560774A公开了一种来源于Catenovulum属的Catenovulumsp. LP214生产浒苔多糖裂解酶制备硫酸鼠李聚糖镶嵌段寡糖，其酶分子量为75.5 kDa；CN 103451119 A公开了一种来源于交替单胞菌属的AlteromonascdwellianaA321菌株生产浒苔多糖降解酶，其酶L1的分子量约为76.4 kDa，酶L2的分子量约为100 kDa左右；CN1189185公开了一种来源于青霉属的产硫酸鼠李聚糖酶菌株（保藏于CNCM保藏号1-1577和1-1578），该菌所产酶具有降解鼠李半乳糖醛酸聚糖的能力。

发明内容

本发明的目的是提供了一株海洋细菌Pseudoalteromonassp SC127及其制备的石莼硫酸鼠李聚糖酶，本发明提供的菌株来源于海洋假交替单胞菌属（Pseudoalteromonas），能够生产硫酸鼠李聚糖酶，有效降解硫酸鼠李聚糖生成寡糖，克服了将硫酸鼠李聚糖应用在保健、医药、农业等方面的困难，对新型寡糖的开发、构效关系研究及应用开发都具有重要的现实意义。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了一株海洋细菌Pseudoalteromonas sp SC127，该菌株于2015 年7月2日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO. M 2015422。

本发明还提供了所述的海洋细菌Pseudoalteromonas sp SC127产生的石莼硫酸鼠李聚糖酶，所述石莼硫酸鼠李聚糖酶通过以下制备方法制得：