[发明专利]用于检测多种呼吸道病毒的PCR引物组、探针组及试剂盒

说明书

本发明公开了用于检测多种呼吸道病毒的PCR引物组、探针组及试剂盒；其中所述PCR引物的各序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.18，所述探针包括两端分别带有荧光基团和淬灭基团的9条呼吸道病毒的分子信标探针中的至少两条，各序列为SEQ ID NO.19～SEQ ID NO.27。本发明还公开包含以上PCR引物和探针的PCR反应液，以及包含至少一人份PCR反应液的试剂盒。利用本发明，可以快速准确地分型检测9种呼吸道病毒。

技术领域

本发明涉及用于检测多种呼吸道病毒的PCR引物组、探针组及试剂盒。

背景技术

呼吸道感染是临床最常见的疾病之一，可由多种病原体引起，其中包括细菌、病毒、支原体、衣原体等。其中急性呼吸道感染(Acute Respiratory Tract Infection，ARTI)是世界范围内导致儿童患病和死亡的重要原因。世界卫生组织(WHO)2005年在《柳叶刀》杂志发表文章报道：在2000-2003年，每年1060万5岁以下死亡儿童中，因传染性疾病死亡占54％，其中因肺炎死亡的患儿占19％。ARTI的严格定义是所有的呼吸道感染，然而，实际上，在严重呼吸道疾病中急性下呼吸道占据大多数，占世界范围内学龄前儿童死亡总数的20％，其中90％为肺炎。大量的证据表明，营养不良、低出生体重、被动吸烟、人工喂养、经济困难、居住环境拥挤、免疫功能缺陷、HIV感染是严重ARTI的危险因素，因此，大多数因急性呼吸道感染死亡的病例发生在发展中国家。ARTI主要的致病微生物包括细菌和病毒，还包括一些非典型病原体，如真菌、支原体、衣原体等，根据临床症状和影像报告临床工作者很难将它们区分，因此病原分析对于临床诊断和治疗至关重要。

传统检测呼吸道病原体的方法主要有培养方法、生化方法和免疫方法等，培养法操作复杂，检测周期长、费用高，不适合作为临床样品的常规检测。生化检测方法操作简单、快速，费用低，是目前门诊检验的常规检测方法；但该方法灵敏度和特异性不高，影响因素多，不能区分病原体的具体种类。免疫检测方法快速简便；但一个检测只能针对其中一种病原体。

随着医疗水平的发展，用上述传统的方法已经不能满足对呼吸道病原体的检测，临床上需要一种能够灵敏、特异，并且快速、简便的呼吸道多病原体鉴定检测方法，以便能够更好的做到个体化的治疗、并满足对卫生防疫和疫情控制、进行传染病流行病学研究的需求。

发明内容

本发明的主要目的在于提出一种准确、快速、灵敏的用于检测多种呼吸道病毒的PCR引物组、探针组、PCR反应液及试剂盒。

其中，所述PCR引物组包括以下至少两对引物对：

由序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的两条序列组成的针对甲型流感病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的两条序列组成的针对乙型流感病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的两条序列组成的针对呼吸道合胞病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的两条序列组成的针对I型副流感病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的两条序列组成的针对II型副流感病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的两条序列组成的针对III型副流感病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示的两条序列组成的针对冠状病毒的引物对；

由序列表中SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16所示的两条序列组成的针对C型鼻病毒的引物对；