[发明专利]一种罗氏沼虾雌激素相关受体基因ERR及其应用

说明书

本发明公开了一种罗氏沼虾雌激素相关受体基因ERR，该基因ERR的核苷酸序列如SEQ ID NO：1中所示，该基因ERR的氨基酸序列如SEQ ID NO:2中所示。本发明还公开了重组罗氏沼虾雌激素相关受体基因ERR在环境内分泌干扰物壬基酚检测和污染评估中的应用，本发明罗氏沼虾ERR蛋白在自然水体环境内分泌干扰物如NP检测和污染评估方面具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种罗氏沼虾雌激素相关受体基因ERR及其应用。

背景技术

雌激素相关受体ERRα和ERRβ最早是Giguere于1988年发现的，针对ERα的DNA结合域(DNA binding domain,DBD)的保守序列，用低严谨度杂交方法筛选到了这两个人类新基因，由于它们与雌激素受体(ER)有很强的同源性，故而得名。目前共发现ERR家族有三个成员，即ERRα(NR3B1)，ERRβ(NR3B2)和ERRγ(NR3B3)，它们和ER共同构成第三类核受体的一个亚族，与ER不同是，它们不与雌激素结合，对雌二醇等天然雌激素的刺激作用没有应答，研究认为ERR可以在没有配体存在的情况下与共激活子(coactivator)作用而激活目标基因的表达，所以它们被成为孤儿核受体。虽然ERR不与雌激素结合，但是最近的研究却表明它们参与ER信号通路，因而成为近期研究热点。

雌激素的生理效应主要是通过靶细胞特异性的细胞核受体－雌激素受体(estrogen receptor,ER)α和β调节的，人们对两种雌激素受体亚型的分子基础和作用机制已经有了较为深入的认识。但在近年来的研究中人们逐渐发现：在某些对雌激素有高应答反应的组织中，却只表达低水平的ER，人们对一种与雌激素的效应也有着密切关系的雌激素相关受体(estrogen related receptor,ERR)的认识为上述问题的解决提供了新的重要的思路和方向。研究表明：ERR也参与了雌激素的复杂信号转导体系，对ERR作用机制及ERR活性调节因子的认识在雌激素相关生理和病理过程研究中有着重要的应用。

和多数核受体一样，ERR分子结构由位于N端的A/B区域、DNA结合域、铰链区D和配体结合域(ligand-binding domain,LBD)组成。N端的A/B区域有一个不依赖于配体的AF1(activationfunction1)，由于不同的剪辑方式会使ERRγ产生缺少AF-1的异构体，目前已经发现两种ERRγ的异构体，ERRγ1和ERRγ2，其中ERRγ2比ERRγ1在N端多23个氨基酸。DBD主要依靠其中的2个锌指结构与靶基因DNA的反应元件结合，而LBD是一个由12个α螺旋(H1～H12)形成的三明治式的结构，疏水性配体通常结合于一个称为配体结合袋(ligandbinding pocket,LBP)的结构中。配体依赖的转录激活由核受体中位于LBD的H12的AF2(activationfunction2)介导，即由H3、H4和H12形成的疏水表面与共激活子家族的LXXLL基序之间的相互作用完成。