[发明专利]一种还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子

权利要求书

1.一种还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

(1)核层壳聚糖基高载药纳米胶束的制备

①将含有反应活性羟基的疏水性抗癌药物、丁二酸酐溶解于有机溶剂中，加入三乙胺进行酯化反应，反应结束后去除未反应的化合物并干燥，得到丁二酸酐改性药物；

②将步骤①中制得的丁二酸酐改性药物溶于有机溶剂中，加入EDC·HCl和NHS对丁二酸酐化药物分子上的羧基进行活化反应；然后加入含有壳聚糖的MES缓冲液，使药物分子的活化羧基与壳聚糖的氨基进行酰胺化反应，反应结束后透析、干燥，得到双亲性的壳聚糖基药物衍生物；

③将步骤②中得到的壳聚糖基药物衍生物溶于盐酸/有机溶剂混合溶剂中，然后在超声条件下缓慢滴加含有反应活性羟基的疏水性抗癌药物的有机溶剂，形成纳米胶束，滴加结束后搅拌使载药完全，然后透析、干燥，得到壳聚糖基高载药纳米胶束；

(2)壳层透明质酸分子的组氨酸和半胱胺修饰

①将透明质酸溶解于磷酸盐缓冲液中，加入EDC·HCl和NHS对羧基进行活化反应，然后加入组氨酸甲酯盐酸盐进行酰胺化反应，反应结束后透析、干燥，得到His-HA；

②将步骤①中制得的His-HA溶解于磷酸盐缓冲液中，加入EDC·HCl和NHS对羧基进行活化反应，然后加入半胱胺盐酸盐进行酰胺化反应，反应结束后透析、干燥，得到His-HA-Cys；

(3)还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备

将步骤(1)中制得的壳聚糖基高载药纳米胶束分散于水中，得到纳米胶束悬浮液；将步骤(2)中制得的His-HA-Cys溶解于水中，配成溶液并在搅拌条件下缓慢滴加到纳米胶束悬浮液中；在静电相互作用下，带负电的His-HA-Cys分子在带正电的壳聚糖基高载药纳米胶束表面沉积，然后去除未反应的反应物，得到具有核壳结构的载药纳米粒子；然后通入氧气，使纳米粒子在壳层部分发生化学交联，生成二硫键，然后干燥，制得还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子。

2.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(1)①和③中所述的含有反应活性羟基的疏水性抗癌药物为四氢吲唑酮、紫杉醇和阿霉素中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(1)②中所述的丁二酸酐改性药物与壳聚糖的质量比为0.2～1。

4.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(2)①中所述的透明质酸的重均分子量为2×104～2×105g/mol。

5.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(2)①中所述的His-HA分子链上组氨酸甲酯盐酸盐的取代度为1％～20％。

6.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(2)②中所述的His-HA-Cys分子链上半胱胺盐酸盐的取代度为1％～20％。

7.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的静电相互作用的时间为4～48h。

8.根据权利要求1所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的通入氧气的时间为1～4h。

9.一种还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子，其特征在于：通过权利要求1～8任一项所述的制备方法制备得到。

10.权利要求9所述的还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子在制备生物医用材料中的应用。