[发明专利]基于微粒子化学发光免疫分析的人血清脂联素检测试剂盒

说明书

基于微粒子化学发光免疫分析的人血清脂联素检测试剂盒，涉及化学发光检测试剂盒。所述人血清脂联素检测试剂盒包括反应缓冲液、包被有脂联素单克隆抗体的磁性微粒子、标记有吖啶酯的脂联素单克隆抗体、发光液A、发光液B、脂联素抗原标准品溶液、浓缩洗涤液。制备方法：制备反应缓冲液；制备包被有脂联素抗体的磁微粒；制备吖啶酯标记的脂联素抗体；制备脂联素抗原标准品溶液；制备发光液；制备洗涤液。采用磁性微粒子偶联单克隆抗体，由于微粒子可以悬浮于样本溶液中，有利于微粒子表面抗体与待测物充分接触，缩短反应时间；以吖啶酯作为标记物，可得到稳定、高强度的信号。操作简单、灵敏度高、线性范围宽、结果稳定、安全性好、便于自动化。

技术领域

本发明涉及化学发光检测试剂盒，尤其是涉及基于微粒子化学发光免疫分析的人血清脂联素检测试剂盒。

背景技术

脂联素(adiponectin)亦称Acrp30、GBP28或AdipoQ，是由脂肪细胞分泌一种激素蛋白，能在人体血浆中稳定存在，浓度范围约为2～30μg/mL，占血浆蛋白总量的0.01％。([1]Arita Y,Kihara S,Ouchi N,et al.Paradoxical decrease of an adipose-specific protein,adiponectin,inobesity[J].Biochem Biophys Res Commun,1999,257(1):79-83)。随着对脂联素研究的不断深入，已发现，脂联素在肥胖症者和II型糖尿病患者血清中的浓度明显低于非肥胖者，其浓度的降低导致了胰岛素抵抗和高胰岛素血症，而脂联素有防止动脉粥样硬化斑块形成的作用，因此，脂联素与肥胖症患者II型糖尿病及冠心病的发生发展密切相关，即脂联素的明显降低预示着II型糖尿病及冠心病的发生明显增加([2]Zhang MH,Spies C,Ali S,et al.Adiponectin and inclucible ischemia inpatients with stable coronary heart disease:data from the Heart and Soulstudy[J].Atherosclerosis,2009,205(1):233-238；[3]Kawano J,Arora R.The role ofadiponectin in obesity,diabetes,and cardiovascular disease[J].J CardiometabSyndr.2009,4(1):44-49)。测定血清中脂联素水平，对这些疾病的诊断和预后有重要意义。

目前，脂联素的临床诊断技术主要包括：放射免疫法(RIA)([4]Schulze MB,ShaiI,Rimm EB,et al.Adiponectin and future coronary heart disease events amongmen with type 2diabetes[J].Diabetes,2005,54(2):534-539)、酶联免疫试验(ELISA)([5]Urbonaviciene G,Frystyk J,Flyvbjerg A,et al.Association of serumadiponectin with risk for cardiovascular events in patients with peripheralarterial disease[J].Atherosclerosis,2010,210(2):619-624)等方法，它们的优点是灵敏度较高，缺点是操作繁琐，耗时长，易受人为操作和外界因素干扰，自动化程度低，而且放射性标记物会对操作者产生危害，对环境造成污染。这些缺点限制了脂联素检测的推广应用，使其无法广泛地应用于临床诊断与科研工作。