[发明专利]一种建立人类心血管疾病家兔模型的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种建立人类疾病的病理模型的方法，具体涉及一种建立人类心血管疾病家兔模型的方法。

背景技术

心血管疾病(CVD)是危害国人健康的第一杀手，研究人类CVD发病机理、寻找预防和治疗措施离不开实验动物模型。目前研究CVD使用数量最多的模式动物是小鼠，但是，用小鼠模型研究人类CVD存在重大缺陷：小鼠的脂代谢特征与人类完全不同，而家兔脂的蛋白谱以及对胆固醇的敏感性则与人完全相同，因而家兔是研究人类CVD独特且理想的模型。我们知道人类CVD发病与脂质代谢异常密切相关，人类所有CVD具有共同的病理基础——动脉粥样硬化，所以，研究人类CVD就要脂质代谢和动脉粥样硬化。然而生物医学研究中广泛使用小鼠和大鼠模型在研究人类CVD存在缺陷：

(1)小鼠与大鼠体内脂蛋白以高密度脂蛋白(HDL)为主，具有先天抗动脉粥样硬化作用，不易形成动脉粥样硬化；

(2)小鼠肝脏既能产生apoB2100，又可以合成apoB48。因此，小鼠的apoB48既存在于肝源性极低密度脂蛋白(VLDL)中，也存在于肠源性乳糜微粒之中，而人类的apoB48只存在于人的乳糜微粒之中。

(3)家兔与人类血浆中有丰富胆固醇酯转移蛋白(CETP)，小鼠缺乏CETP。

(4)与小鼠相比，家兔缺乏与人相似的apoA-II且具有较低的肝酯 酶(HL)活性。家兔与小鼠以上差异，显示在研究脂蛋白代谢与CVD病理基础(动脉粥样硬化)方面，家兔优于小鼠和大鼠，因而家兔是研究人类CVD一个独特而理性的动物模型。

发明内容

本发明根据上述现有技术中存在的不足，提供一种建立人类心血管疾病家兔模型的方法。

为了达到上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种建立人类心血管疾病家兔模型的方法，所述的方法其步骤如下：(1)建立标准人类动脉粥样硬化和高脂血症家兔模型，用胆固醇饲料饲喂日本大耳白家兔和新西兰家兔，检测血脂变化，饲喂胆固醇饲料6周、8周、10周、12周、16周、20周、24周、28周后，分析家兔血脂组成和各个动脉的动脉粥样硬化损伤，建成生物医学研究需要的、标准的人类心血管疾病研究需要的各个阶段的动脉粥样硬化和高脂血症家兔模型；(2)进行药效学研究，利用已经建成的标准模型，开展2～3个药物抗动脉粥样硬化和降血脂研究；(3)建立基因修饰家兔模型，利用显微注射技术和以及TALENs、CRISPR/Cas9技术，制作成功人类心血管病2～3个家兔模型。

所述的胆固醇饲料是一种含0.1％～0.6％的胆固醇饲料。

所述的主动脉包括胸主动脉、腹主动脉、冠状动脉和颈总动脉。

本发明的有益效果是：本发明使得我们制作基因敲除(knock-out)家兔模型成为可能，拓展人类CVD预防、治疗和新药开发的新思路。研究和开发标准人类CVD家兔模型、GM家兔模型、利用家兔模型筛选预防和治疗心血管病药物等显得十分重要。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作具体说明。

本发明是一种建立人类心血管疾病家兔模型的方法，所述的方法其步骤如下：(1)建立标准人类动脉粥样硬化和高脂血症家兔模型，用胆固醇饲料饲喂日本大耳白家兔和新西兰家兔，检测血脂变化，饲喂胆固醇饲料6周、8周、10周、12周、16周、20周、24周、28周后，分析家兔血脂组成和各个动脉的动脉粥样硬化损伤，建成生物医学研究需要的、标准的人类心血管疾病研究需要的各个阶段的动脉粥样硬化和高脂血症家兔模型；(2)进行药效学研究，利用已经建成的标准模型，开展2～3个药物抗动脉粥样硬化和降血脂研究；(3)建立基因修饰家兔模型，利用显微注射技术和以及TALENs、CRISPR/Cas9技术，制作成功人类心血管病2～3个家兔模型。

所述的胆固醇饲料是一种含0.1％～0.6％的胆固醇饲料。

所述的主动脉包括胸主动脉、腹主动脉、冠状动脉和颈总动脉。