[发明专利]水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的同时测定方法

说明书

技术领域

本发明属于维生素检测技术领域，尤其涉及一种水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的同时测定方法。

背景技术

维生素C又称L-型抗坏血酸，是一种抗氧化剂，由于可以治愈因缺乏维生素C会造成坏血病，所以命名为抗坏血酸，它主要来源新鲜水果和蔬菜，是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素，由于抗坏血酸在常态下不稳定，具有生理功能，还原型和氧化型都有生理活性。

测定VC常用的方法有2，6-二氯靛酚靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼比色法、荧光法、电位法和高效液相色谱法等。2，6-二氯靛酚滴定法、电位滴定法和高效液相色谱法测定的都是还原型抗坏血酸。2，4-二硝基苯肼比色法和荧光法是先用氧化剂将还原型抗坏血酸氧化成脱氢型抗坏血酸，最后测定的是总坏血酸。这些方法只是对测定单个还原型抗坏血酸或总抗坏血酸含量，对面对大批样品，需要测样品中还原型抗坏血酸、脱氢型抗坏血酸和总抗坏血酸三种含量时，往往需要几种不同的方法一起使用，实验过程费时，实验结果误差较大。

发明内容

本发明的目的在于提供一种水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的同时测定方法，旨在解决测定VC常用的方法只是对测定单个还原型抗坏血酸或总抗坏血酸含量，对面对大批样品，需要测样品中还原型抗坏血酸、脱氢型抗坏血酸和总抗坏血酸三种含量时，往往需要几种不同的方法一起使用，实验过程费时，实验结果误差较大的问题。

本发明是这样实现的，一种水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的测定方法，该水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的测定方法包括以下步骤：

将新鲜果品加草酸提取总抗坏血酸，得提取液，将提取液分成2份；

一份加氧化剂硫酸铜氧化，得氧化后的总抗坏血酸混合液，用2，4-二硝基苯肼比色法测定总抗坏血酸的含量；

另一份加抗氧化剂硫脲，得氧化前的脱氢型抗坏血酸混合液，用2，4-二硝基苯肼比色法测定氧化前的脱氢型抗坏血酸含量；

将试样中还原型抗坏血酸经活性碳氧化为脱氢型抗坏血酸后，再加入2.4-二硝基苯肼作用生成红色脎，用1cm比色杯，以空白溶液调零点，于500nm波长处测定其吸收值；

将得到的总抗坏血酸的含量与得到的氧化前的脱氢型抗坏血酸含量相减得还原型抗坏血酸的含量。

进一步，所述总抗坏血酸包括还原型抗坏血酸、脱氢型抗坏血酸和二酮古乐糖酸。

进一步，所述将试样中还原型抗坏血酸经活性碳氧化为脱氢型抗坏血酸后，再加入2.4-二硝基苯肼作用生成红色脎，根据脎在硫酸溶液中的含量与抗坏血酸含量成正比。

采用本发明测定了苹果、梨等水果中三种不同抗坏血酸含量，其标准曲线稳定，线型范围为1～10μg/mL，相关系数达到0.99以上。

附图说明

图1是本发明实施例提供的水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的测定方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

新鲜水果中同时含有还原型和脱氢型两种类型的抗坏血酸，现有的方法一般都是测定还原型抗坏血酸或者总抗坏血酸，忽略了脱氢型抗坏血酸的含量和活性，本发明通过一次提取，不同处理，同时测水果中脱氢型和总抗坏血酸的含量，通过差减法计算获得还原型抗坏血酸的含量。

下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作详细描述。

如图1所示：一种水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的测定方法，该水果中还原型、脱氢型和总抗坏血酸含量的测定方法包括以下步骤：

S101：将新鲜果品加草酸提取总抗坏血酸，得提取液，将提取液分成2份；

S102：一份加氧化剂硫酸铜氧化，得氧化后的总抗坏血酸混合液，用2，4-二硝基苯肼比色法测定总抗坏血酸的含量；

S103：另一份加抗氧化剂硫脲，得氧化前的脱氢型抗坏血酸混合液，用2，4-二硝基苯肼比色法测定氧化前的脱氢型抗坏血酸含量；

S104：将试样中还原型抗坏血酸经活性碳氧化为脱氢型抗坏血酸后，再加入2.4-二硝基苯肼作用生成红色脎，在500nm处进行比色测定；

S105：将得到的总抗坏血酸的含量与得到的氧化前的脱氢型抗坏血酸含量相减得还原型抗坏血酸的含量。

所述总抗坏血酸包括还原型抗坏血酸、脱氢型抗坏血酸和二酮古乐糖酸。