[发明专利]一种小RNA分子及其在抗病毒中的应用

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体的说是一种小RNA分子及其在抗病毒中的应用。小RNA分子具有下列序列：5’‑UUCCGGGUGUUUUCGUGUCUUU‑3’。本发明小RNA分子注射鱼类后能够显著提高鱼类抗病毒免疫基因表达以及抑制病毒复制。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体的说是一种小RNA分子及其在抗病毒中的应用。

背景技术

非编码小RNA在动物和植物的生命过程中起重要作用。这些小RNA调控转录后基因表达，其通常作用机制是通过与靶mRNA特异性结合，阻止mRNA的翻译，从而调控发育、免疫、细胞凋亡、病原与宿主相互作用等各种生命活动。研究表明，许多病毒利用小RNA操纵宿主的基因表达以促进病毒侵染；与病毒蛋白相比，小RNA分子小，没有免疫原性，容易规避宿主的免疫防御。对宿主而言，许多动物能够合成病毒基因靶向性的小RNA，这些小RNA特异性识别并结合病毒靶mRNA，干扰病毒基因的表达，导致病毒复制被抑制。因此，小RNA在病毒病的免疫防御中具有巨大的应用潜能。

发明内容

本发明目的在于提供一种小RNA分子及其在抗病毒中的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种小RNA分子，小RNA分子具有下列序列：5’-UUCCGGGUGUUUUCGUGUCUUU-3’

一种小RNA分子的应用，所述小RNA分子可应用于制备刺激抗病毒免疫基因表达或抑制病毒复制的制剂。

所述病毒为细胞肿大病毒。

本发明具有如下优点：本发明的小RNA分子注射鱼类后能够显著抑制病毒复制和提升鱼类抗病毒免疫基因表达。

附图说明

图1为本发明实施例提供的小RNA分子731A刺激牙鲆抗病毒免疫基因IFN、ISG15、Mx和viperin的表达(**P<0.01；*P<0.05)。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例旨在对本发明进行举例描述，而非以任何形式对本发明进行限制。

实施例1

小RNA分子731A刺激抗病毒免疫基因表达

步骤1)小RNA分子稀释液制备

本发明的小RNA分子731A的序列为5’-UUCCGGGUGUUUUCGUGUCUUU-3’。小RNA分子731A由上海Genepharma公司合成。731A在PBS中稀释至200ug/ml，即为小RNA分子稀释液。

所述PBS组成成分按重量百分比计：0.8％NaCl,0.02％KCl,0.358％Na₂HPO₄.12H₂O,0.024％NaH₂PO₄，余量为水。

步骤2)病毒悬液制备

将细胞肿大病毒RBIV-C1(具体制备方法见Zhang M,Xiao Z,Hu Y,SunL.Characterization of a megalocytivirus from cultured rock bream,Oplegnathusfasciatus(Temminck&Schlege),in China.Aquac Res.2012；43:556–64)于PBS中稀释至10⁶copies/ml，即为病毒悬液。

步骤3)小RNA分子混合液和对照混合液的制备