[发明专利]一种促进金线莲类原球茎分化的外源添加物培养基

说明书

技术领域：

本发明属于生物领域，具体而言，涉及一种促进金线莲类原球茎分化的外源添加物培养基。

背景技术：

金线莲(Anoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl)，又名金线兰、金丝草，是兰科开唇兰属多年生草本植物。素有药王、金草、鸟人参等美名，是民间广泛使用的珍贵药材，其株型小巧，叶脉金黄色，呈网状排列，叶形美观。主要分布在福建、台湾、广东、贵州、四川、云南等地。喜阴湿，生长在海拔300-1200米常绿阔叶林的潮湿地带，温度为20-25℃，忌阳光直射。金连线以全草入药，具有清热凉血、降低血糖血压、抗炎等作用，临床上主要用于治疗糖尿病，高血压及肿瘤等。

近些年，由于不合理的狂采滥挖加之对生长环境要求苛刻，金线莲野生资源濒临灭绝，人工栽培难度大，市场供需矛盾凸显。利用植物组织培养技术实现快速繁殖，是可持续利用该资源的一个重要途径，但目前金线莲组织培养一般利用茎段进行繁殖，其繁殖系数较低，因此通过类原球茎的分化能显著提高金线莲组培苗的繁殖系数，是能满足市场需求，降低生产成本的有效途径。

类原球茎为胚胎发生与器官发育的复合体，是组培过程中的人工种子。在组培快繁体系中，利用类原球茎的增殖和分化，能显著的提高金连线组培苗的增殖系数，为大规模种植金线莲提供技术支持。

发明内容：

本发明的目的是提供一种促进金线莲类原球茎分化的外源添加物培养基，以提高类原球茎的分化率。该培养基的组成包括：基础培养基和外源添加物。

所述基础培养基的组分及含量为：

KNO₃80-2900mg/L，NH₄NO₃105-1520mg/L，KH₂PO₄19-410mg/L，MgSO₄·7H₂O240-750mg/L，CaCl₂·2H₂O145-460mg/L，KCl0-67mg/L，KI0.7-1.7mg/L，H₃BO₃0.7-6.3mg/L，MnSO₄·4H₂O4-25mg/L，ZnSO₄·7H₂O1.5-8.6mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O0-0.28mg/L，CuSO₄·5H₂O0-0.35mg/L，CoCl₂·6H₂O0-0.03mg/L，Na₂-EDTA0-38mg/L，FeSO₄·7H₂O24-29mg/L，肌醇0-100mg/L，甘氨酸0-2.5mg/L，V_B10.1-11.0mg/L，V_B60.4-1.2mg/L，烟酸0.3-1.5mg/L，6-苄基腺嘌呤(以下简称6-BA)0.2-3.0mg/L，萘乙酸(以下简称NAA)0.2-2.0mg/L，蔗糖20-30g/L，琼脂4.0-7.0g/L，活性炭0.5-4.0g/L。

所述的外源添加物为土豆提取液、香蕉提取液或二者组成的混合提取液，总体积分数为0.1-20％，混合添加物提取液的体积分数比为土豆提取液∶香蕉提取液＝1-35∶1-25。

本发明一种促进金线莲类原球茎分化的外源添加物培养基定为A培养基，其配制为现有配制方法，其中外源添加物的配制方法如下：

将土豆削皮洗净，称取300g土豆切成约2cm²的块状，加入800ml的纯净水，微沸30min，用纱布过滤即得，定容至1升，配成土豆提取液母液；将香蕉去皮称取300g切成约2cm²的块状，加入800ml的纯净水，微沸30min，用纱布过滤即得，定容至1升，配成香蕉提取液母液。配成母液后，吸取相应地体积。