[发明专利]一种蛹虫草复合益生菌酵素及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物发酵生产技术领域，特别涉及一种蛹虫草复合益生菌酵素及其制备方法。

背景技术

众所周知，冬虫夏草是我国名贵的中药材，与人参、鹿茸并称“三大中药补品”，而蛹虫草作为冬虫夏草的近缘物种，具有与冬虫夏草相似的有效成分和生物活性，是虫草菌研究中的“模式物种”，已成为冬虫夏草的有效替代品被广泛接受，2009年3月18日，卫生部发布2009年第三号公告，批准蛹虫草为新资源食品，这为蛹虫草产业在食品加工领域的应用敞开了大门，对蛹虫草药效起作用的物质一般属于核苷类、糖醇类、多糖类、氨基酸类、酶类以及矿物元素等。已确定的功能因子主要有虫草素、腺苷、甘露醇、虫草多糖、超氧化物歧化酶（SOD）等。蛹虫草的生理功能主要包括：提高免疫、抗疲劳、抗肿瘤、抗辐射、降血糖、降血脂、延缓衰老、镇定作用等。

目前，蛹虫草的人工培养主要包括子实体培植及菌丝体发酵，子实体培植周期长、经历的生理过程复杂，得到的子实体口感较差，现有菌丝体发酵中，一般采用一次发酵，产品功效单一，不易吸收，特别是虫草酸中的主要成分D-甘露醇较难被人体吸收，造成营养物质流失。

益生菌与人体健康有着密切关系,作为一种生物添加剂在食品中广泛应用,发挥重要的生物学效应，添加益生菌的食品可以改善消化功能，促进胃肠蠕动,

将底物中的淀粉等大分子多糖分解成低聚糖，蛋白质分解为氨基酸，并保留蛹虫草菌种发酵产生的虫草素，虫草多糖，SOD，腺苷。同时在发酵液中存有大量复合益生菌产生的胞外酶类。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明将益生菌引入蛹虫草菌丝发酵液中，进行二次发酵，利用益生菌进一步将底物中的淀粉等大分子多糖分解成低聚糖，蛋白质分解为氨基酸，并保留蛹虫草菌种发酵产生的虫草素，虫草多糖，SOD，腺苷等，使产品的口感、功能性及吸收性都大大提高。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的，具体包括以下步骤：

a）菌种液体培养基的制备：

按马铃薯与水的质量比为1：2~10配比进行加热煮沸，过滤得到上清液，在上清液中按每份马铃薯加入0.01~0.1份磷酸二氢钾、0.01~0.1份硫酸镁、0.02~0.2份酵母浸膏、0.01~0.1份蛋白胨，高温灭菌后备用；

b）发酵菌种制备：

取步骤a）中的液体培养基转移到两个三角烧瓶中，经高温灭菌后，分别加入蛹虫草菌种和复合益生菌菌种进行培养，得到蛹虫草液体菌种和复合益生菌液体菌种；

c）发酵底物制备：

发酵底物成分：鸡蛋1~10%wt、大米粉10~40%wt、余量为水，调节pH值为6.0~7.0，经100~150℃灭菌；

d）第一次发酵：

取步骤c）中得到的发酵底物放入发酵罐1，加入无菌水，经过实消以后，加入步骤b）中所述蛹虫草液体菌种发酵70~100h；

e）第二次发酵：

将发酵罐1中发酵后的物料再次实消一次，全部转移到发酵罐2作为第二次发酵的底物，加入步骤b）中复合益生菌液体菌种发酵60~80h，

f）产物获得：

第二次发酵完成后，滤除发酵液中固体物，即得到蛹虫草复合益生菌酵素。

进一步，步骤a）中，煮沸时间为10~80min，定容体积为煮沸马铃薯时加水的体积。

进一步，步骤b）中，菌种培养条件为25℃、80~150r/min摇床上避光培养24~48h。

更进一步，步骤d）中，发酵罐1为通气式机械搅拌发酵罐，第一次发酵属需氧型发酵；步骤e）中，发酵罐2为机械搅拌式发酵罐，第二次发酵半厌氧型发酵。

本发明还提供一种蛹虫草复合益生菌酵素，按照上述任一方法制得。

本发明具有以下有益效果：

1、首次将复合益生菌发酵同蛹虫草液体菌丝发酵进行结合，利用蛹虫草菌种与复合益生菌之间的协同作用，以蛹虫草菌种发酵液为底物，作为复合益生菌发酵底物，两次发酵分步进行，互不影响；

2、实现了酵素成分的原生多样性，既含有蛹虫草有效成分，又含有复合益生菌的有效成分，两者结合，使产品的功能性及人体吸收性都大大提高，同时实现了蛹虫草液体菌丝中D-甘露醇到D-甘露糖的转化，含有的所有成分物理、化学性质稳定，不同于后期添加调和。

实施方式

下面对本发明的具体实施方式进行说明：

a）菌种液体培养基的制备：