[发明专利]核酸偶联物、其制备方法及其应用

权利要求书

1.一种核酸偶联物，其特征在于，所述核酸偶联物的分子式为X-Y-B，其中，X为穿膜肽，Y是与所述X共价连接的柔性链段，B是与所述Y共价连接的核酸药物；所述柔性链段是由中性聚合物形成的线性结构的链段，所述柔性链段由聚乙二醇形成，所述中性聚合物的分子量为3500～10000，所述B与所述Y共价连接的共价键包括二硫键、腙键、酰胺键、酯键或醚键，所述穿膜肽选自序列号为SEQ ID NO:1的LMWP，所述核酸药物包括核苷酸单体或寡聚核苷酸，所述寡聚核苷酸为长度为19～23bp的siRNA。

2.根据权利要求1所述的核酸偶联物，其特征在于，所述长度为19～23bp的siRNA为SEQID NO:17至SEQ ID NO:172中的任意一种。

3.根据权利要求1或2所述的核酸偶联物，其特征在于，所述核酸偶联物的给药途径为静脉注射、黏膜给药或者经皮给药；所述黏膜给药包括鼻腔黏膜、口腔黏膜、直肠黏膜和阴道黏膜中的任意一种。

4.根据权利要求1或2所述的核酸偶联物，其特征在于，所述核酸偶联物的给药途径为皮下注射。

5.一种核酸偶联物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

穿膜肽的活化步骤，将穿膜肽的N端或C端特异性地与中性聚合物进行共价结合，得到活化的穿膜肽；

核酸药物的活化步骤，在所述核酸药物反义链的3’端或者正义链的任意一端引入不同于磷酸基团或羟基基团的反应活性基团，得到活化的核酸药物；以及

共价连接步骤，所述活化的穿膜肽与所述活化的核酸药物通过亲核反应或亲电加成反应得到所述核酸偶联物；

所述中性聚合物为聚乙二醇，所述中性聚合物的分子量为3500～10000；

所述穿膜肽选自序列号为SEQ ID NO:1的LMWP，所述核酸药物包括核苷酸单体或寡聚核苷酸，所述寡聚核苷酸为长度为19～23bp的siRNA，所述反应活性基团包括氨基、巯基、羧基、马来酰亚胺基和N-羟基琥珀酰亚胺基中的任意一种。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述长度为19-23bp的siRNA为SEQ IDNO:17至SEQ ID NO:172中的任意一种。

7.一种权利要求1至4中任一项所述的核酸偶联物在体外筛选药物中的应用。