[发明专利]基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒及其分型方法在审
申请号: | 201610083701.5 | 申请日: | 2016-02-06 |
公开(公告)号: | CN105671153A | 公开(公告)日: | 2016-06-15 |
发明(设计)人: | 张忠英;白永颖;方宜臻 | 申请(专利权)人: | 厦门大学附属中山医院;张忠英 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361004 福建省厦*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 allglo 探针 cyp2c9 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于包括实时荧光定量PCR 试剂、阳性对照及阴性对照;
所述CYP2C9*3为美国国家生物技术信息中心所提供人10号染色体CYP2C9基因中的 SNP位点。
2.如权利要求1所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于所述 实时荧光定量PCR试剂包括以下组份:10×Taq缓冲液、10mmol的MgCl2、5u/μL的Taq HotstartDNA聚合酶、10mmoldNTPs混合液、50×LowROX、100mL无核酶水、10μmol/L CYP2C9*3的特异正向引物、10μmol/LCYP2C9*3的特异反向引物和AllGlo探针;所述 10×Taq缓冲液包括100mmolTris-HCl和500mmolKCl。
3.如权利要求1所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于所述 CYP2C9*3的特异正向引物的核苷酸序列为:
SEQIDNO.1:5'-AGCCACATGCCCTACACAGAT-3';
所述CYP2C9*3的特异反向引物的核苷酸序列为:
SEQIDNO.2:5'-GAGAAACAAACTTACCTTGGGAATG-3'。
4.如权利要求1所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于所述 AllGlo探针为CYP2C9*3的特异探针,其核苷酸序列为:
SEQIDNO.3:CYP2C9*3-A:MAR-CCAGAGATACATTGAC-MAR;
SEQIDNO.4:CYP2C9*3-C:JUP-CCAGAGATACCTTGAC-JUP。
5.如权利要求1所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于所述 阳性对照包括:阳性纯合对照品1、阳性纯合对照品2、阳性杂合对照品;所述阳性纯合对照 品1为CYP2C9*3分型为AA的DNA样品,所述阳性纯合对照品2为CYP2C9*3分型为CC 的DNA样品,所述阳性杂合对照品为CYP2C9*3分型为AC的DNA样品。
6.如权利要求1所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于所述 阴性对照为1mL的无核酶水。
7.基于AllGlo探针CYP2C9*3检测分型方法,其特征在于其步骤如下:
1)采用常规方法提取EDTA抗凝全血样本中的DNA;
2)采用如权利要求1~6中任一所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒提供 的实时荧光定量PCR试剂将DNA进行实时荧光定量PCR扩增;
3)根据检测到的荧光信号对人CYP2C9基因CYP2C9*3位点进行分型。
8.如权利要求1所述基于AllGlo探针的CYP2C9*3检测分型试剂盒,其特征在于所述 AllGlo探针采用美国A1leLogicBiosciencesCorporation公司的荧光定量探针。
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