[发明专利]一种表达载体及胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达方法在审
| 申请号： | 201610082935.8 | 申请日： | 2016-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN105524942A | 公开（公告）日： | 2016-04-27 |
| 发明（设计）人： | 王一飞;陈海佳;葛啸虎;任哲;马岩岩 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C07K14/47 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 表达 载体 胰岛素 生长因子 结合 蛋白 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种表达载体，其特征在于，包括IGFBP-3基因和TEV基因。
2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的骨架 为pUC57-simple。
3.一种宿主细胞，其特征在于，其被权利要求1或2的表达载体转染。
4.根据权利要求3所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为293f 细胞。
5.一种融合蛋白的表达方法，其特征在于，以权利要求1或2的的表达 载体转染宿主细胞后培养。
6.根据权利要求5所述的表达方法，其特征在于，所述宿主细胞为293f 细胞。
7.根据权利要求5所述的表达方法，其特征在于，所述培养的培养基为 含有体积分数为10％的FBS的DMEM培养基。
8.根据权利要求5所述的表达方法，其特征在于，所述培养的条件为37℃， CO2体积分数为5％。
9.一种胰岛素样生长因子结合蛋白3的制备方法，其特征在于，以权利 要求1或2的的表达载体转染宿主细胞后培养，培养所得融合蛋白经TEV蛋 白酶处理，获得胰岛素样生长因子结合蛋白3。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述TEV蛋白酶处 理具体为使所述融合蛋白经过proteinA预装柱后，以含有TEV蛋白酶的溶液 洗脱。
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