[发明专利]一种从西兰花种子中提取分离萝卜硫苷的方法

说明书

本发明涉及一种从西兰花种子中提取分离萝卜硫苷的方法，包括以下步骤：(1)从西兰花种子中提取萝卜硫苷溶液，并将其进行浓缩得到萝卜硫苷浓缩液；(2)将萝卜硫苷浓缩液用大孔吸附树脂进行吸附；(3)用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，得到树脂洗脱液；(4)将树脂洗脱液进行浓缩后，加入硅胶混合，挥发乙醇，得到吸附萝卜硫苷的硅胶，并将其加至由硅胶填柱所得的硅胶柱上层；(5)用洗脱剂对硅胶柱进行洗脱，收集洗脱液，并将洗脱液进行浓缩、干燥，即得萝卜硫苷产品。与现有技术相比，本发明工艺简单易行，容易工业化，大孔树脂和硅胶价廉、易得，整个工艺价格便宜，投资少，并且能够得到高纯度的萝卜硫苷产品。

技术领域

本发明涉及天然产物纯化方法，具体涉及一种从西兰花种子中提取分离萝卜硫苷的方法。

背景技术

萝卜硫苷(4-甲基亚磺酰基丁烯基硫代葡萄糖苷)广泛存在于十字花科植物中，如西兰花、羽衣甘蓝、抱子甘蓝、花椰菜、辣根、大白菜等[中国农学通报,2008,24(2):335-338；食品科技,2009,34(12):250-252]，其中以西兰花、花椰菜中有效成分最多，特别是西兰花种子中含量最高。萝卜硫苷的降解产物主要萝卜硫素，萝卜硫素腈，嚅唑烷硫酮等，其中含量最高的是萝卜硫素[食品科技,2009,34(12):250-252]。萝卜硫素是迄今为止蔬菜中发现的抗癌活力最强的一类异硫代氰酸盐，是目前公认的防癌和抗癌效果最好的天然产物之一。能够抑制I相酶和诱导Ⅱ相酶的表达，对肝癌、乳腺癌、肺癌、食道癌、前列腺癌、胃癌有明显的阻断作用，并且萝卜硫素还具有保护皮肤、抗菌、提高机体抗氧化能力和免疫力等药理作用[食品发酵与工业，2011,37(7):197-200]。但萝卜硫素很不稳定，而萝卜硫苷比较稳定，并且可以在生物体内水解成萝卜硫素等，因此研究萝卜硫苷的分离提纯是非常必要的。

我国对萝卜硫苷的分离进行了一些的研究，但目前高效分离得到高纯度的萝卜硫苷方法不多。如专利CN103709211采用花椰菜为原料提取分离萝卜硫苷，先用弱极性的大孔树脂初次分离后，再次用硅胶柱分离得到高纯度的萝卜硫苷，但是采用的原料萝卜硫苷含量较低，体积较大，不易储运，因此收率较低。专利CN102295667经过多次萃取和制备色谱柱分离后，得到了高纯度萝卜硫苷，但是制备色谱规模小，单次得到产品量少，不利于工业化生产。因此，寻找一种通过简单廉价的分离提纯方法得到高含量的萝卜硫苷产品，将对开发以萝卜硫苷为主要活性成分的药品和保健品的发展具有积极推动作用。

中国专利CN 104961667 A公布了一种萝卜硫素的纯化方法，该方法包括以下步骤：(1)制备萝卜硫素溶液；(2)对萝卜硫素溶液进行萃取，然后萃取液浓缩，得到萝卜硫素浓缩液；(3)将萝卜硫素浓缩液与硅藻土混合，挥发溶剂，得到吸附萝卜硫素的硅藻土；(4)用硅藻土填柱，将吸附萝卜硫素的硅藻土加至硅藻土柱上层；(5)用洗脱剂进行洗脱，收集不同溶剂的洗脱液；(6)将洗脱液浓缩、干燥即得吸附萝卜硫素产品。该发明采用硅藻土分离萝卜硫素，工艺简单易行，容易工业化，硅藻土价廉、易得，整个工艺价格便宜，投资少，并且能够得到高纯度的萝卜硫素产品(纯度大于95％)。但该专利分离的是萝卜硫素，萝卜硫素是萝卜硫苷经黑芥子硫酸苷酶酶解或酸水解，脱掉一分子葡萄糖后生成一个中间体，并在一定条件下通过重组反应产生的异硫氰酸盐衍生物。萝卜硫苷和萝卜硫素分子结构不同，性质有很多差异，因此分离提纯方法也不一样。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种操作简单、环保节能、纯度高、成本低的从西兰花种子中提取分离萝卜硫苷的方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种从西兰花种子中提取分离萝卜硫苷的方法，主要包括以下步骤：

(1)从西兰花种子中提取萝卜硫苷溶液，并将所得的萝卜硫苷溶液进行浓缩得到萝卜硫苷浓缩液；

(2)将步骤(1)所得萝卜硫苷浓缩液用大孔吸附树脂进行吸附；

(3)用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，得到树脂洗脱液；