[发明专利]一种应用于胶体金免疫层析的硝酸纤维素膜预处理方法

说明书

技术领域

本发明属于胶体金免疫层析技术，具体涉及一种应用于胶体金免疫层析的硝酸纤维素 膜预处理方法。

背景技术

胶体金免疫层析技术以其特异性强、灵敏度高、操作简捷等特点,在医学、农牧业、 环境及食品检测等领域被广泛应用。胶体金技层析术的反应过程是一个由纳米金颗粒、抗 原与抗体在试纸上结合层析的反应过程,在这个过程中每个环节的好坏都直接影响检测结 果的准确性。

硝酸纤维素膜材料因为拥有低成本、毛细流动稳定、高蛋白结合能力、处理相对容 易（有聚酯背衬的膜）和拥有不同的吸水速率和表面活性组分的特点，从而被大多数免疫层 析诊断产品系统选用。

尽管硝酸纤维素膜有这些积极的特性，硝酸纤维素膜也有许多的缺陷。这些缺陷 包括：功能易受环境变化（例如湿度）影响，批内批间性能和重复性差。

现有的胶体金免疫层析方法中，刚生产出的膜一般含有5-10%的水分。关于膜的老 化机理，有个理论支持，不过争议比较大。理论认为:膜的老化是因为膜上的水分蒸发，使 膜变得疏水，带电荷并变脆。储存膜一般要求是避光，密封。过干或过湿都不利。在这种保存 条件下，一般可以放置两年。湿度过低，膜上容易聚集静电荷，点膜容易出现散点，导致测试 会出现疏水斑。湿度过高，膜上毛细作用加强，点膜容易引起CT线变宽甚至扩散。为了保证 点样时膜湿度的均一性，改善批内重复性和批间重复性，本专利发明了一种新的硝酸纤维 素膜预处理方方法。

发明内容

1、本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种应用于胶体金免疫层析的 硝酸纤维素膜预处理方法。

2、一种胶体金免疫层析的硝酸纤维素膜预处理方法，依次包括如下步骤：（1）粘 膜：硝酸纤维素膜与背衬、PVC板粘在一起（2）干燥：粘好的硝酸纤维素膜放入鼓风干燥箱 20°C-37°C干燥4-10小时（3）平衡：干燥后的硝酸纤维素膜放在温度为18℃-28℃，湿度60%- 70%状态下，避光平衡1-2小时（4）点膜。

3、所述的干燥温度优选20～37℃，干燥时间优选4～10小时。

4、所述的干燥温度进一步优选20℃，干燥时间进一步优选4小时。

5、所述的平衡温度18℃-28℃，湿度60%-70%状态下，避光平衡1-2小时。

6、所述的平衡温度进一步优选为20℃，湿度65%状态下，避光平衡1小时。

7、所述点膜为标准的台式或者连续点膜机点膜。

本发明的有益效果：硝酸纤维素膜通过预处理，批内硝酸纤维素膜在划膜过程中， 划膜液出现疏水斑率和扩散率明显下降；硝酸纤维素膜通过预处理后制成的胶体金试纸 卡，加入样品检验，其批内重复性和批间重复性得到进一步优化，可以明显提高胶体金试纸 检测的准确性和检测效率。

具体实施方式

实施例1

1、粘膜：将PVC底板上的膜片位置的保护层揭掉，露出黏合剂，将硝酸纤维素膜与PVC底 板相应位置对齐黏贴。

2、干燥：将粘好硝酸纤维素膜的PVC底板放入鼓风干燥箱内干燥，选择温度20℃， 干燥4小时，将干燥后的硝酸纤维素膜放入装有干燥剂的铝箔袋内密封保存，有效期为3个 月。

3、平衡：取出干燥过的硝酸纤维素膜在温度20℃，湿度65%，避光的环境中放置1小 时平衡。

4、质控线工作液的制备：以3%海藻糖的PBS溶液做溶剂配制0.9mg/ml的羊抗鼠多 克隆抗体溶液。

5、检测线工作液的制备：以3%海藻糖的PBS溶液做溶剂配制0.7mg/ml的降钙素原 单克隆抗体溶液。

6、点膜：利用台式点膜喷金机将事先配制好的质控线和检测线工作液在平衡过的 硝酸纤维素膜上点膜，点膜速度为1ul/cm，质控线与检测线平行，两线相隔6mm，细致均匀， 放入鼓风干燥箱内37℃鼓风干燥20小时。

实施例2

1、为了进一步说明运用在胶体金免疫层析法中的硝酸纤维素膜预处理的优越性，我 们采用了将同样的胶体金免疫层析法，将硝酸纤维素膜预处理改成对硝酸纤维素膜不进行 预处理方法，运用到降钙素原检测试剂卡的实际应用中，

胶体金试纸条的具体制备方法如下：

1)包被膜的制备：