[发明专利]检测舌癌组织中长链非编码RNALOC284454表达量的试剂的应用

说明书

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学领域，具体涉及检测舌癌组织中长链非编码RNA LOC284454表达量的试剂用于制备舌癌辅助诊断或者疗效预测制剂的用途。

背景技术

人类基因组计划及其后续的DNA元件百科全书计划(The Encyclopedia of DNA Elements Project,ENCODE)研究成果表明，蛋白编码基因序列仅占人类基因组序列的1-3％，而人基因组中绝大部分可转录的序列为长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)。LncRNA广泛地存在于各种生物中，且随着生物复杂程度的升高，基因组中lncRNA序列的比例也相应地增大，提示lncRNA在生物进化过程中有重要意义。随着lncRNA不断被发现，它们的功能逐渐被诠释，科学家们发现lncRNA广泛而活跃地参与到生命活动不同层面的功能调控中，作为一个崭新的领域，已经成为国际生命科学研究领域新的前沿与热点。

LncRNA可作为功能蛋白质的信号(signal)、诱导(guide)、诱饵(decoy)或支架(scaffold)分子等多种方式，在染色质重构、基因转录、翻译及蛋白修饰等多重水平调控基因的表达，并在包括发育、免疫、生殖等基本生理过程中扮演了不可替代的角色，更重要的是，lncRNA的表达与功能失调已经与包括恶性肿瘤在内的人类多种疾病紧密联系在了一起。因此，深入研究lncRNA的功能，揭示由lncRNA介导的遗传信息传递方式和表达调控网络，不仅可以从蛋白编码基因以外的角度重新注释和阐明基因组的结构与功能，深入发现生命活动的本质和规律，还有望从一个新的视角认识包括肿瘤在内的多种人类常见疾病的发病机理，并为这些疾病的诊断与治疗提供新的分子标志物与治疗靶点。

舌癌是最常见的口腔癌，男性多于女性。舌癌多数为鳞癌，多发生于舌缘，其次为舌尖、舌背及舌根等处，常为溃疡型或浸润型。一般恶性程度较高，生长快，浸润性较强，常波及舌肌，致使舌运动受限，使说话、进食及吞咽均发生困难。肿瘤的发生发展是多基因参与、多步骤、多阶段的复杂过程，LncRNA在舌癌的发生发展过程中可能也起到了重要的作用。最近我们在舌癌中发现lncRNA LOC284454(NCBI accession number:NR_036515)在舌癌中表达显著上调，LOC284454表达高的患者更容易发生转移，其生存时间短于该lncRNA表达低的患者，因此针对该lncRNA的检测制剂也可以用于舌癌的预后判断。

发明内容

本发明的目的是提供检测舌癌组织中长链非编码RNA LOC284454表达量的试剂用于制备舌癌辅助诊断或者疗效预测制剂的用途。

检测舌癌组织中长链非编码RNA LOC284454表达量的试剂的应用，所述的试剂用于制备舌癌辅助诊断或者疗效预测制剂；该长链非编码RNA LOC284454的序列如SEQ NO:1所示。

所述的舌癌辅助诊断或者疗效预测制剂为实时荧光定量检测试剂。

所述的实时荧光定量检测试剂中包含用于实时荧光定量检测LOC284454表达的引物序列：

正向引物：5’-AGCCATCCTCCCACCTTAGT-3’，

反向引物：5’-TCCTCAGTCCCACCCAGAAA-3’。

所述的实时荧光定量检测试剂中包含内参基因GAPDH特异性PCR引物：

正向引物5’-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3’

反向引物5’-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3’。

本发明通过实时荧光定量PCR技术检测lncRNA LOC284454在舌癌患者(167例)和舌癌癌旁组织(45例)中的表达情况；LOC284454在舌癌中的表达比癌旁组织中显著提高，还通过原位杂交在舌癌和舌癌癌旁上皮存档石蜡组织标本中发现LOC284454在舌癌中表达显著上调，且LOC284454的表达与预后密切相关，LOC284454表达高的患者生存时间更短，提示LOC284454可作为舌癌预后预测的分子标志。本发明为舌癌的辅助诊断和预后预测提供了强有力的分子生物学工具，具有深远的临床意义和重要的推广应用前景。

附图说明

图1为实时荧光定量PCR技术检测lncRNA LOC284454在舌癌患者(167例)和舌癌癌旁组织(45例)中的表达情况；LOC284454在舌癌中的表达比癌旁组织中显著提高，p<0.001；