[发明专利]一种透明质酸‑甲基纤维素复合凝胶的活性酯交联方法

权利要求书

1.一种透明质酸-甲基纤维素复合凝胶的活性酯交联方法，其特征在于，聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酐和去乙酰化透明质酸反应得到交联活性酯，所述交联活性酯与甲基纤维素交联，形成透明质酸-甲基纤维素复合凝胶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体操作为：

(1)将预先配制好的第一份人工脑脊液加热至90℃，加入一定量的氯化钠、磷酸钠和甲基纤维素，搅拌均匀后再加入等体积的第二份人工脑脊液，-4℃冰盐浴中搅拌40min，得到甲基纤维素溶液，4℃冷藏过夜；

(2)将聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酐配制成水溶液，加入去乙酰化透明质酸溶液中，搅拌使溶液混合均匀，室温下反应12h，再向溶液中加入质量分数为95％的乙醇至沉淀产生完全，过滤收集沉淀，用乙醇洗涤沉淀3次以上，真空干燥，得到交联活性酯；

(3)称取一定量的交联活性酯加入甲基纤维素溶液中，调节pH至7.4，搅拌2h以上使交联活性酯充分分散且溶解均匀，4℃冷藏过夜，并对其冷冻干燥，得到透明质酸-甲基纤维素复合凝胶。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，氯化钠、磷酸钠、甲基纤维素、去乙酰化透明质酸的质量之比依次为(2～4)：(0～0.05)：7：1。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酐水溶液的浓度为1×10^-3mol/L，与去乙酰化透明质酸溶液的体积比为1：10。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酐的制备方法为：

(1)将分子量为6000的聚乙二醇，溶解于二氧六环中，以吡啶作为催化剂，加入琥珀酸酐，加热状态下回流搅拌，反应完毕后冷却，在快速搅拌下滴加无水乙醚至沉淀不再产生，之后置于冰浴中搅拌，过滤后将沉淀充分溶解于二氯甲烷中，再次滴加无水乙醚至沉淀不再产生，冰浴搅拌，将过滤得到的沉淀真空干燥；

(2)将步骤(1)得到的沉淀与N-羟基琥珀亚酰胺溶于含有二环己基碳化二亚胺的N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌12h后，在快速搅拌下滴加无水乙醚至沉淀不再产生，之后置于冰浴中搅拌，过滤后将沉淀充分溶解于二氯甲烷中，再次滴加无水乙醚至沉淀不再产生，冰浴搅拌，过滤，用无水乙醚多次洗涤，将沉淀进行真空干燥，得到所述的聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酐。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，聚乙二醇、琥珀酸酐、吡啶、N-羟基琥珀亚酰胺、二环己基碳化二亚胺的摩尔比依次为1：1：0.695：2.453：2.563；聚乙二醇与各溶剂的质量体积比为聚乙二醇：二氧六环：步骤(1)中所用的二氯甲烷：步骤(2)中所用的二氯甲烷：N,N-二甲基甲酰胺＝0.48g：20mL：30mL：30mL：1mL。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，回流搅拌时的温度为100℃，搅拌时间为4h；步骤(1)和步骤(2)中，两次冰浴搅拌的时间均为：首次搅拌30min，第二次搅拌15min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述去乙酰化透明质酸的制备方法为：向透明质酸的水溶液中滴加氢氧化钠溶液，缓慢搅拌，使透明质酸与氢氧化钠溶液充分接触，反应2h，得到去乙酰化透明质酸。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述透明质酸水溶液的浓度为9.8×10^-3mol/L，氢氧化钠溶液的浓度为1mol/L；氢氧化钠溶液的添加量以调节pH值至12.65±0.05为准。

10.权利要求1-9任一项所述方法制备得到的透明质酸-甲基纤维素复合凝胶。