[发明专利]长链非编码RNA LOC284454的干扰制剂及其应用有效
| 申请号: | 201610065199.5 | 申请日: | 2016-01-29 |
| 公开(公告)号: | CN105602951B | 公开(公告)日: | 2018-09-11 |
| 发明(设计)人: | 郭灿;曾朝阳;熊炜;李小玲;李桂源;唐艳艳;杨丽婷;孛昊;李夏雨;龚朝建;张文玲;邓昊 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;A61K48/00;A61K31/713;A61P35/04;C01B33/12;B82Y30/00;B82Y40/00 |
| 代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 袁靖 |
| 地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 长链非 编码 rna loc284454 干扰 制剂 及其 应用 | ||
1.长链非编码LOC284454的RNA干扰制剂的应用,其特征在于,用于制备抑制鼻咽癌细胞的侵袭与转移的制剂;所述的干扰制剂包括构建的靶向长链非编码LOC284454的RNA干扰载体,该长链非编码RNA LOC284454的序列如SEQ NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的长链非编码LOC284454的RNA干扰制剂的应用,其特征在于,构建所述的长链非编码LOC284454的RNA干扰载体所需的干扰靶点序列为以下三条中的任意一条或者几条:
shRNA-1:GACTCAGAATCAGACCTGTGT,
shRNA-2:GCATAGATAGGTGGGTGAGTG,
shRNA-3:GACACAAGCAGGTGTGCTTAG。
3.根据权利要求1所述的长链非编码LOC284454的RNA干扰制剂的应用,其特征在于,所述的RNA干扰制剂还包括阴性对照Scramble序列:5’-GACACGCGACTTGTACCAC-3’。
4.根据权利要求1所述的长链非编码LOC284454的RNA干扰制剂的应用,其特征在于,
针对lncRNA干扰靶点序列,及Scramble序列,根据载体设计形成发夹结构的寡核苷酸单链及其反向互补序列,它们退火后即形成两端分别带限制性酶切位点粘性末端的DNA双链,用于连接载体。
5.根据权利要求4所述的长链非编码LOC284454的RNA干扰制剂的应用,其特征在于,所使用的原始载体为pSUPER。
6.根据权利要求4所述的长链非编码LOC284454的RNA干扰制剂的应用,其特征在于,
具体需合成的各条寡核苷酸序列及它们配对退火后形成的DNA双链如下:
shRNA-1:
5’-GATCCCC GACTCAGAATCAGACCTGTGT TTCAAGAGA ACACAGGTCTGATTCTGAGTC TTTTTA-3’
3’-GGG CTGAGTCTTAGTCTGGACACA AAGTTCTCT TGTGTCCAGACTAAGACTCAG AAAAATTCGA-5’,
shRNA-2:
5’-GATCCCC GCATAGATAGGTGGGTGAGTG TTCAAGAGA CACTCACCCACCTATCTATGC TTTTTA-3’
3’-GGG CGTATCTATCCACCCACTCAC AAGTTCTCT GTGAGTGGGTGGATAGATACG AAAAATTCGA-5’,
shRNA-3:
5’-GATCCCC GACACAAGCAGGTGTGCTTAG TTCAAGAGA CTAAGCACACCTGCTTGTGTC TTTTTA-3’
3’-GGG CTGTGTTCGTCCACACGAATC AAGTTCTCT GATTCGTGTGGACGAACACAG AAAAATTCGA-5’,
Scramble
5’-GATCCCC GACACGCGACTTGTACCAC TTCAAGAGA GTGGTACAAGTCGCGTGTC TTTTTA-3’
3’-GGG CTGTGCGCTGAACATGGTG AAGTTCTCT CACCATGTTCAGCGCACAG AAAAATTCGA-5’。
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