[发明专利]野生棉苗期耐低温鉴定方法

说明书

本发明属于植物生理学，具体地，涉及野生棉苗期耐低温鉴定方法。所述方法包括步骤1)种子硫酸脱绒和切口处理；2)催芽处理；3)培养幼苗，选择3‑5叶期长势一致的棉花幼苗；4)选择更接近自然条件的低温胁迫处理，5)根据棉花幼苗的受害情况进行评分，对野生棉的抗性水平进行分级。该方法选择在对低温最敏感的幼苗期进行严苛的低温胁迫处理，以期筛选到真正具有较高抗性水平的耐低温棉花材料；而且根据棉花叶片受害情况进行评分，客观分级，极大降低了人为因素造成的误差。该方法不受季节限制，随可进行大批量材料的鉴定，易于推广和利用。

技术领域

本发明涉及植物生理学和作物栽培学，具体地，本发明涉及野生棉苗期耐低温鉴定方法。

背景技术

棉属包括4个栽培棉种和47个野生棉种，栽培棉种经过长期的人为定向选择(偏向纤维)，缺少逆境生存的优良特性。而野生棉种长期生活在自然环境中，不经受人工选择压力，具有多样性丰富、抗逆性强等优良性状。若要充分利用棉花野生资源所特有的抗逆性状，必然需要对棉花野生资源的耐低温性状进行鉴定和评价，其首要条件是寻找到一种合理有效的适合野生棉花的耐低温鉴定方法。

目前，针对棉花栽培品种耐低温鉴定方法主要有萌发期出苗率鉴定法和苗期大田直接鉴定法。萌发期出苗率鉴定法主要是针对栽培棉种，而野生棉的种子外壳极度致密坚硬，自然条件无法正常萌发，所以传统的萌发期耐低温鉴定法并不适合野生棉种；苗期大田鉴定法，受年份、地区、温度、湿度等环境因素的影响极大，实验重复性差。而且缺少明确的评价体系，结果受个人主观因素影响很大。因此，探索一种适合野生棉的苗期耐低温鉴定的标准方法和高效的评价体系，对棉花野生资源的利用及耐低温棉花新品种的培育具有重要的指导意义。

发明内容

本发明的目的是探索一种适合棉花野生种质资源的苗期耐低温鉴定方法，以期快速高效地对棉花野生种质资源进行客观可靠的鉴定，为棉花耐低温新品种的培育奠定理论基础和材料基础。

根据本发明的棉花苗期耐低温鉴定方法，包括以下步骤：

1)种子的前处理：种子硫酸脱绒，选择籽粒饱满成熟的种子，用单面刀片在种子合点端(钝端)切小口，大小1mm×1mm，种壳切破露出种仁即可。

2)催芽：准备砂床，选择合适的砂土洗净，煮沸灭菌后，将湿砂铺在发芽盒中。将切口的野生棉种子，播种在准备好的沙床上，然后加盖一层松散砂，砂床含水量为12％-15％。置于恒温光照培养箱中培养，常温培养2～3天。野生棉难以出苗，经以上处理保证野生棉能够正常发芽。

3)移苗和育苗：将萌发的种子移入装好营养土和蛭石的营养钵内，人工气候室培养，常规管理，培育幼苗至3-5叶期。

4)低温胁迫处理：移入低温5℃的人工气候培养箱内，其他光照和湿度条件与常温(30℃)条件完全一致。处理48h后，调查幼苗的受害情况。将处理后的幼苗转移到常温条件下恢复生长两周，再次调查幼苗长势。目前棉花陆地棉报道的15℃以上的低温，对野生棉棉种起不到鉴定作用，在15℃处理条件下，材料之间没有区别把，温度设置为5℃，所有野生棉种包括陆地棉对照中都有明显的区别。

5)耐低温水平分级：根据叶片受害情况对棉花幼苗耐低温水平进行调查和评分，计算耐低温指数，根据耐低温指数对其耐低温水平进行分级。