[发明专利]一种抗大豆疫霉根腐病基因及应用

说明书

本发明公开了一种抗大豆疫霉根腐病基因及应用，属于大豆遗传育种技术领域。本发明所提供的抗大豆疫霉根腐病基因是大豆GmDRR基因，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的基因可用于植物的遗传育种，尤其是大豆的遗传育种。同时，本发明还提供了该基因的应用方法，尤其是利用基因鉴定或筛选抗大豆疫霉根腐病品种的方法。通过检测本发明所提供的基因的表达量可预测其对大豆疫霉根腐病的抗性，大大提高了大豆抗疫霉根腐病的选择效率。

技术领域

本发明涉及一种抗大豆疫霉根腐病基因及应用，属于大豆遗传育种技术领域。

背景技术

大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)引起的一种严重危害大豆生产的世界性病害之一，其危害面积非常之大，是程度很严重的土壤传播性病害。到现在为止，其在大豆一些主要产区的危害势头锐不可挡。因此，新抗疫霉根腐病基因的挖掘显得至关重要。针对大豆抗疫霉根腐病寻找大豆内地基因，并同时比较抗感大豆资源在基因水平的差异，对从分子水平了解大豆抗疫霉根腐病机制和培育抗病品种具有重要的理论和实际意义。

但是，虽然研究者已完成大豆全基因组测序，但仍未发现在大豆基因组中的能够起到抗大豆疫霉根腐病的基因。而没有大豆抗疫霉根腐病的关键基因，对于农业育种过程的抗病大豆品种筛选十分不利，品种筛选的效率很低。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种抗大豆疫霉根腐病基因及其应用，所采取的技术方案如下：

本发明的目的在于提供一种抗大豆疫霉根腐病基因，该序列尚未公开基因是大豆基因GmDRR，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述基因在大豆育种过程中的应用。

优选地，所述基因在分子标记辅助选择育种中的应用。

进一步，所述应用是使用特异性引物GmDRRf和GmDRRr进行PCR扩增，其中，特异性引物GmDRRf的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，特异性引物GmDRRr的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。

本发明的另一目的是提供一种利用所述基因鉴定或筛选抗大豆疫霉根腐病品种的方法，该方法是以大豆GmUKN1基因或actin基因为内参基因，利用PCR定量分析待鉴定品种的GmDRR基因的表达量差异，分析待鉴定品种的大豆疫霉根腐病的抗性。

优选地，所述大豆疫霉根腐病的抗性，是对大豆疫霉根腐病菌1号和3号生理小种的抗性。

所述方法的步骤如下：

1)利用大豆疫霉根腐病菌1号或3号生理小种感染待测品种，获得感染品种；

2)提取步骤1)所得的感染品种的cDNA，并以所得的cDNA为模板，以内参基因GmUKN1引物对和目的基因GmDRR的特异性引物对为引物进行PCR扩增，并通过荧光定量PCR仪实时 检测；

3)根据步骤2)的检测结果分析待测品种的大豆疫霉根腐病抗性。

优选地，步骤2)所述目的基因GmDRR的特异性引物对，为引物GmDRRf和GmDRRr，核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述内参基因GmUKN1引物对，分别如SEQID NO.4和SEQ ID NO.5所示。

优选地，所述PCR扩增，扩增条件为：先在95℃30s的条件下进行一个循环，再在95℃5s；60℃30s的条件下进行40个循环。

优选地，步骤3)所述分析待测品种的大豆疫霉根腐病抗性，是，如果在待测品种在接种大豆疫霉根腐病菌6h后在根、茎和叶中基因GmDRR的表达量快速增加，则待测品种为抗性品种；如果在接种大豆疫霉根腐病菌6h后基因GmDRR的表达量变化不明显，则为感病品种。

本发明获得的有益效果如下：