[发明专利]一种基于微生物组装合成的砷污染土壤修复固定剂及其制备和应用方法

权利要求书

1.一种基于微生物组装合成的砷污染土壤修复固定剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）采用培养基活化及扩大培养丝状真菌，备用；

（2）将α-Fe₂O₃纳米粒子加入液体培养基内分散；

（3）纳米粒子和培养基灭菌处理；

（4）在超净无菌操作台内，将步骤（1）中已活化和培养的菌丝体接种至步骤（3）的灭菌培养基中；

（5）步骤（4）中已接种的培养基振荡培养形成的菌丝球；

步骤（1）中所述丝状真菌为一类呈丝状，丛生，具有高横纵比的真菌，包括曲霉和/或青霉；

步骤（5）培养2-4天后，用去离子水润洗形成的菌丝球2-5次后放置在质量浓度2.5-5%的戊二醛内于4℃下保存。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中将α-Fe₂O₃纳米粒子加入液体培养基内，固液比为0.1-2g：100-200mL，超声分散；所述α-Fe₂O₃纳米粒子，要求粒径<30nm，纯度＞99.5%。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中采用超声分散，功率50-100瓦，超声波震荡0.5-3h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述灭菌处理为将含α-Fe₂O₃纳米粒子的培养基放入至灭菌锅内，设置115℃，灭菌25min；高温高压灭菌后，含α-Fe₂O₃纳米粒子的培养基放入超净无菌操作台内，开紫外灯灭菌30-90min。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中接种比例为纳米α-Fe₂O₃：液体培养基：菌液=0.1-2g：100-200mL：0.5-3mL，菌液中菌丝体质量浓度为5.5-6mg/mL。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（5）将步骤（4）中已接种的培养基在26-30℃下转速140-180rpm条件下培养2-4天。

7.一种基于微生物组装合成的砷污染土壤修复固定剂，其特征在于，是由权利要求1-6任一项所述的方法制备而成的。

8.权利要求7所述的砷污染土壤修复固定剂的应用方法，其特征在于，砷污染土壤加入所述的固定剂，再加入去离子水，质量比为土壤：固定剂：水=100:（1-5）：（100-300），混合均匀，处理时间至少7天。