[发明专利]一种纤维寡糖的单体制备方法在审
申请号: | 201610057255.0 | 申请日: | 2016-01-27 |
公开(公告)号: | CN105695641A | 公开(公告)日: | 2016-06-22 |
发明(设计)人: | 朱汉静;朱汉生;刘镏;陈冬劲 | 申请(专利权)人: | 江苏康维生物有限公司 |
主分类号: | C13K13/00 | 分类号: | C13K13/00 |
代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 韩洪 |
地址: | 224200 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纤维 寡糖 单体 制备 方法 | ||
1.一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
步骤一、制备混酸:采用86.2%的甲酸和36%的盐酸按质量比为4:1的比例 混合后得到混酸,备用;
步骤二、水解制取纤维寡糖:在具塞锥形瓶中加入固液比为1:24的脱脂棉 和经步骤一制得的混酸,并将具塞锥形瓶放置在恒温水浴锅中水解处理,得 到含有纤维寡糖的水解液;
步骤三、过滤水解液:经步骤二水解处理后,将具塞锥形瓶中的水解液倒入 G5漏斗中,过滤除去水解液中的不溶物,得到含有纤维寡糖的滤液;
步骤四、回收并中和混酸:将步骤三得到的滤液放置在旋转蒸发仪上回收甲 酸和盐酸,再用氢氧化钠中和滤液中的剩余酸;
步骤五、再次过滤:将步骤四处理后的滤液再次过滤,得到淡黄色含有不同 聚合度的粗纤维寡糖溶液;
步骤六、一次分离:将经步骤五得到的粗纤维寡糖溶液在AKTAExplorer层 析系统上分离,以XK16/100为层析柱,以Bio-GelP2凝胶为分离介质,用 示差折光检测器检测,采用洗脱液洗脱,进行纤维寡糖溶液的第一次分离, 得到较高含量纤维三糖至纤维六糖的不同组分;
步骤七、二次分离:将步骤六得到的较高含量纤维三糖至纤维六糖的不同组 分分别在AKTAExplorer层析系统上进行二次分离,得到高纯度不同聚合度 的纤维寡糖单一组分。
2.如权利要求1所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的步 骤二中的恒温水浴锅的温度设定为65±1℃。
3.如权利要求1所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的步 骤二中的水解时间为10h。
4.如权利要求1所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的步 骤六中的层析柱的柱温设定为48℃,洗脱液为脱气超纯水,洗脱速度为 0.5mL/min。
5.如权利要求1所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的步 骤六中在AKTAExplorer层析系统上的上样纤维寡糖总糖浓度为68.62g/L, 上样量为200mL。
6.如权利要求1所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的步 骤七的二次分离以XK16/100为层析柱,以聚丙烯酰胺凝胶Bio-GelP2为分 离介质,用示差折光检测器检测,采用脱气超纯水洗脱。
7.如权利要求6所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的层 析柱XK16/100的柱温设为48℃。
8.如权利要求6所述的一种纤维寡糖的单体制备方法,其特征在于:所述的脱 气超纯水的洗脱速度为0.5mL/min。
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