[发明专利]一种海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法

权利要求书

1.海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，通过以下步骤完成：

(1)原料混合步骤

称取一定量的海藻酸钠充分溶解于蒸馏水中形成一胶体溶液，向该胶体溶液中加入适量的木聚糖酶液，调节pH至6.0～7.0，充分搅拌混匀，得到混合液1；

分别称取一定量的壳聚糖和氯化钙溶解于蒸馏水中，调节pH至3.0～6.0，充分搅拌混匀，得到混合液2；

(2)微球成形及包覆步骤

采用带有针头的蠕动泵将步骤(1)所得混合液1，滴入至步骤(1)所得混合液2中，得到直径2～3mm的光滑微球；

(3)低温固化步骤

将步骤(2)中所得光滑微球置于3℃-10℃环境中进行低温固化得到固化微球，其中低温固化时间为1～4h；

(4)洗脱过滤步骤

将步骤(3)制备的固化微球以蒸馏水冲洗去除表面残留杂质得到洗脱微球；

(5)低温干燥步骤

将洗脱微球置于35～45℃的恒温干燥箱内进行低温干燥得到近似球型颗粒，干燥时间4～8h；

(6)颗粒成型

筛选步骤(5)得到的近似球型的固定化酶颗粒。

2.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述海藻酸钠质量百分比浓度为1.0～3.0％，所述壳聚糖质量百分比浓度为0.5～4.5％,氯化钙质量百分比浓度为0.5～2.5％。

3.如权利要求1或2所述的海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述混合液1制备过程中的pH值采用质量百分比浓度为5％的醋酸溶液进行调节。

4.如权利要求1或2所述的海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述混合液2制备过程中的pH值采用质量百分比浓度为5％的醋酸溶液进行调节。

5.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述混合液1以3滴/秒的速度滴入至步骤(1)所得混合液2中。

6.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤(3)重复三次。

7.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖固定木聚糖酶的方法，其特征在于，步骤(6)得到的近似球型颗粒的固定化木聚糖酶进行包埋率、稳定性及酶活回收率测定方法如下：

固定化酶的包埋率测定：固定化酶的包埋率(％)＝固定化酶量(g)/酶总添加量(g)×100％；

固定化酶活回收率测定：酶活回收率(％)＝固定化酶的总活力/游离酶的总活力×100％

固定化酶的稳定性测定：分别取一定量的固定化酶与游离酶；(a)在18℃、28℃、38℃、48℃、58℃、68℃、78℃温度下分别测定固定化酶与游离酶的活力；(b)在pH值为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0值下测定固定化酶与游离酶的活力。