[发明专利]桃PpeAMT1;1基因、转运蛋白、表达载体及其构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及桃PpeAMT1；1基因、转运蛋白、表达载体及其构建方法，属于分子生物学和生物技术领域。

背景技术

铵离子(NH₄⁺)是最主要的无机氮存在形式，是植物优先吸收的氮素营养，与植物的生长、发育和果实品质密切相关。铵肥在促进果实品质与产量等生理方面起重要作用，施用适量铵肥不仅可以显著地增强果实的内在品质，也可以改善了果实的外观品质。然而，相关报道主要集中在生理生化层面，有关果实品质、产量与NH₄⁺的吸收、转运及其代谢的分子机理的报道鲜少。

植物对NH₄⁺的吸收是依赖定位于细胞质膜上的AMT转运体来实现完成的，分为AMT1和AMT2两个基因亚族。Ninnemann等从拟南芥中克隆并鉴定了第一个植物AMT1成员基因，迄今为止，关于该类基因结构与功能的报道主要集中在一年生草本植物拟南芥、番茄、百脉根、油菜和水稻等为研究材料。报道显示AMT1基因主要在一年生植物体的根部表现出高表达，主导根部NH₄⁺的吸收(Preferentialexpressionofanammoniumtransporterandoftwoputativenitratetransportersinroothairsoftomato,LauterFR,NinnemannO,BucherM,RiesmeierJW,FrommerWB,Proc.Natl.Acad.Sci.USA；Threefunctionaltransportersforconstitutive,diurnallyregulated,andstarvation-induceduptakeofammoniumintoArabidopsisroots,GazzarriniS,LejayL,GojonA,NinnemannO,FrommerWB,PlantCell；Differentialregulationofthreefunctionalammoniumtransportergenesbynitrogeninroothairsandbylightinleavesoftomato,vonWirénN,LauterFR,NinnemannO,GillissenB,Walch-LiuP,EngelsC,JostW,FormmerWB,PlantJournal；FunctionalcharacterizationofanammoniumtransportergenefromLotusjaponicas,SalveminiF,MariniAM,RiccioA,PatriarcaEJ,ChiurazziM,Gene；Distinctexpressionandfunctionofthreeammoniumtransportergenes(OsAMT1；1–1；3)inrice,SonodaY,IkedaA,SaikiS,vonWirénN,YamayaT,YamaguchiJ,PlantCellPhysiol)，或主要在叶片表达，主导地上部的转运(FunctionalcharacterizationofanammoniumtransportergenefromLotusjaponicas,SalveminiF,MariniAM,RiccioA,PatriarcaEJ,ChiurazziM,Gene；Characterizationofthreefunctionalhigh-affinityammoniumtransportersinLotusjaponicuswithdifferentialtranscriptionalregulationandspatialexpression,D'ApuzzoE,RogatoA,Simon-RosinU,ElAlaouiH,BarbulovaA,BettiM,DimouM,KatinakisP,MarquezA,MariniAM,UdvardiMK,ChiurazziM,PlantPhysiology)。然而，植物AMT1家族基因成员的功能尚未完全清楚，AMT家族基因在果实发育及品质形成的具体功能及其调控机制更是未知的。由于木本植物具有多年生长的特性，具有与草本植物截然不同的氮素吸收转运特点，它们的AMT同源基因调控方式与生理功能亦有所差别，因此，从木本植物果实中分离并鉴定新的AMT同源基因具有重要意义。

发明内容