[发明专利]具有降氨能力的肝细胞培养基及其应用有效
| 申请号： | 201610054449.5 | 申请日： | 2016-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN105524876A | 公开（公告）日： | 2016-04-27 |
| 发明（设计）人： | 周平;柳小英;李亚丽;陈露;闵娅兰 | 申请（专利权）人： | 武汉仝干生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 倪娅;陈卫 |
| 地址： | 430206 湖北省武汉*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 具有 能力 肝细胞 培养基 及其 应用 | ||
1.一种具有降氨能力的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝细 胞培养基以RPMI1640培养基为基础培养基，含有10％胎牛血清， 还含有肝细胞生长因子、L-鸟氨酸-α-酮戊二酸、胰岛素。
2.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞培养基中肝细胞生长因子的含量为10～20μg/L、L-鸟氨酸-α-酮戊 二酸的含量为1～5mM、胰岛素的含量为0.5～1.0U/L。
3.根据权利要求1或2所述的肝细胞培养基，其特征在于：所 述肝细胞培养基中还含有5～12g/L的谷氨酸盐，所述谷氨酸盐为谷氨 酸钠和/或谷氨酸钾。
4.根据权利要求3所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞培养基中还含有0.5～1.0g/L的精氨酸。
5.根据权利要求4所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞培养基中肝细胞生长因子的含量为13～16μg/L、L-鸟氨酸-α-酮戊 二酸的含量为2～3mM、谷氨酸钠的含量为7～12g/L、精氨酸的含量为 0.53～0.75g/L。
6.根据权利要求4所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞培养基中肝细胞生长因子的含量为17～19μg/L、L-鸟氨酸-α-酮戊 二酸的含量为2～3.5mM、谷氨酸钾的含量为5～8g/L、精氨酸的含量 为0.75～0.85g/L。
7.根据权利要求4所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞培养基中肝细胞生长因子的含量为15～18μg/L、L-鸟氨酸-α-酮戊 二酸的含量为3.7～4.5mM、谷氨酸钠的含量为8.3～10.2g/L、谷氨酸钾 的含量为1.5～1.8g/L、精氨酸的含量为0.8～0.9g/L。
8.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞培养基还含有抗氧化剂，为还原型谷胱甘肽和/或维生素C，其 在培养基中的含量为10～50mg/L。
9.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于：所述肝 细胞为L-02细胞。
10.一种利用权利要求1所述的肝细胞培养基培养肝细胞的方 法，其特征在于：每50ml所述肝细胞培养基接种的肝细胞数量小于 或等于2.2×107，培养条件为5％CO2，37℃，每24小时更换培养基， 48小时后，细胞铺满率为80～90％。
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