[发明专利]一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及其制备使用方法

权利要求书

1.一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物，其特征是含有双链聚核苷酸、阴离子硫酸聚糖与阳离子ε‐聚赖氨酸及金属阳离子相互复合而成的复合物；阴离子硫酸聚糖是指含硫酸基的亲水性阴离子聚糖或其衍生物，并能与双链聚核苷酸、ε‐聚赖氨酸及金属阳离子相互复合成水溶性复合物溶液，所述阴离子硫酸聚糖为肝素、硫酸软骨素A、香菇多糖硫酸酯或牛膝多糖硫酸酯，终浓度为1.0g—10g/L；所述双链聚核苷酸指阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物，来源是天然提取或人工合成；所述天然提取双链聚核苷酸来源于呼肠孤病毒科病毒的核酸提取物，所述天然提取双链聚核苷酸为鸡传染性法氏囊病毒RNA、轮状病毒RNA、羊蓝舌病病毒RNA或非洲马瘟病毒RNA；人工合成的双链聚核苷酸是聚肌胞；所述双链聚核苷酸的终浓度为1.0g—10g/L；所述阳离子ε‐聚赖氨酸是指阳离子的含有25‐30个赖氨酸残基的ε‐氨基同型单体聚合物；双链聚核苷酸、硫酸聚糖与ε‐聚赖氨酸的比例是双链聚核苷酸的磷酸根所具有的阴离子电荷数与硫酸聚糖的硫酸基所具有的阴离子电荷数总和与ε‐聚赖氨酸的氨基所具有的阳离子电荷数比为1：1；金属阳离子是Ca²⁺、Zn²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺中的一种或一种以上，且金属离子呈可溶性金属盐的形式，终浓度为0.2mmol—4mmol/L；复合物溶液pH范围是7.0‐8.0。

2.如权利要求1所述的具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物，其特征是所述阴离子硫酸聚糖的终浓度为1.0g/L；肝素或硫酸软骨素A终浓度为1.0g/L；对应加入ε‐聚赖氨酸；对应可溶性金属盐是CaCl₂，终浓度为0.4mmol/L；制剂所用溶剂为0.01mol/L，pH＝7.6的PBS缓冲液。

3.如权利要求1所述的具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的制备方法，是将阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物、阴离子硫酸聚糖或其衍生物和阳离子ε‐聚赖氨酸及金属阳离子相互复合，而制成复合物，其操作步骤如下：

a.阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物母液配制：

将阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物用PBS缓冲液配制成浓度1‐20mg/ml的溶液，并经0.2‐0.45μm孔径的滤膜过滤除菌；

b.阴离子硫酸聚糖或其衍生物母液配制：

将阴离子的聚糖或其衍生物用PBS缓冲液配制成浓度2‐60mg/ml的溶液，并经0.2‐0.45μm孔径的滤膜过滤除菌；

c.阳离子ε‐聚赖氨酸母液配制：

将阳离子ε‐聚赖氨酸用PBS缓冲液配制成浓度1‐30mg/ml的溶液，并经0.2‐0.45μm孔径的滤膜过滤除菌；

d.金属阳离子溶液母液配制：

将金属阳离子可溶性盐用注射用水配制成浓度为0.1mol/L的溶液，并经0.2‐0.45μm孔径的滤膜过滤除菌；

e.双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物制备：双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物制备一般原则：在4℃下，首先向阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物母液中滴加配方量的阴离子的硫酸聚糖或其衍生物母液，边滴加，边搅拌；接下来按配方量，再缓慢滴加阳离子ε‐聚赖氨酸母液，边滴加，边搅拌，最后滴加配方量的金属阳离子溶液母液，边滴加，边搅拌形成最终双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物，补加PBS缓冲液，同时调节pH值至7.0‐8.0，并在4℃下连续搅拌12小时后将复合物溶液分装于密封容器中，沸水浴30分钟，然后在水流中迅速降至室温，经0.2‐0.45μm孔径的滤膜过滤除菌制成无菌的双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物。

4.如权利要求3所述的具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε‐聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的制备方法，其特征是：通过下列给药途径中的一种途径给药于人类或动物，所述给药途径为肌肉注射、腹腔注射、静脉注射、皮下注射、经呼吸道吸入、直肠给药、阴道给药、经口给药、经鼻给药、经眼给药、透皮或皮内给药。