[发明专利]天花粉蛋白在增强疫苗特异性抗体中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，更具体地讲，涉及天花粉蛋白在增强疫苗特异性抗体中的应用。

背景技术

每年流感病毒流行除引发较高致死率，对于世界大流行病的发生也是一个重大威胁，对于儿童与老年人，发病率与死亡率更高。接种流感疫苗是预防和控制流感发生的主要措施之一，接种季节性流感疫苗对于控制流感的发生发挥着举足轻重的作用。目前，被批准使用的流感疫苗分为两大类：灭活流感疫苗和减毒流感活疫苗。灭活流感疫苗主要分为以下几类：全病毒灭活疫苗、灭活病毒裂解产物疫苗和灭活亚单位疫苗。现阶段较为广泛应用的是三价灭活裂解疫苗。而利用鸡胚生产、对每年新流行的毒株的疫苗至少需要6个月。虽然在过去的三十年里，生产重组蛋白的速度、效率的提高为开发亚单位疫苗提供了新的机遇。然而，与传统的减毒或灭活疫苗相比，亚单位疫苗免疫原性比较低，缺少安全有效的人用佐剂严重制约了该类的疫苗开发，疫苗的产能不足问题在流感大爆发时尤显突兀。因此，提高流感疫苗产能，控制流感大流行的根本在于寻找能提高流感疫苗特异性抗体的方法，相关研究亦是当前疫苗研究的热点之一，比如可通过提高疫苗抗原的免疫原性，从而降低每剂疫苗的抗原用量最终提高疫苗产能。

流行性脑脊髓膜炎(epidemic cerebrospinal meningitis)是最常见的传染病之一，具有传染性强、人群隐性感染多的特点，主要分为普通型和爆发型两种。患者临床表现为剧烈头痛、频繁呕吐、高热不退等症状，常留下脑实质损害的后遗症。病情严重的发生败血症并累及呼吸和循环系统造成其功能衰竭，危及生命。

流脑的高发地区是非洲、亚洲和南美洲，平均每年发生30-50万病例，对儿童和老年人危害尤为严重，爆发型流脑感染儿童其病死率可高达40％-60％，老年人为17.6％。我国曾出现过5次全国性流脑大流行，其中在1967年春季的流脑流行创造了我国有史以来最强的发病高峰，发病率高达403/10万，病死率5.49％。

因此，流脑疫苗接种是预防和控制流脑发生的关键措施，我国自1980年起正式批准生产A群流脑多糖疫苗，极大地控制了流脑的全国爆发。但是根据近20年来的数据，我国每年流脑发病人数都会达到上千人，而且1994年、2003年流脑发生了两次较明显的发病率反弹现象，2003年度全国报告2490例，与去年同期上升0.53％，死亡134例，死亡数增加8.06％，统计显示其毒力存在着8-10年一个周期的爆发规律，预计下一个发病人数反弹高峰即将到来。造成这一现象的主要原因主要包括两个方面：

首先，A群流脑流行的优势基因型周期性的变换，导致此病周期性流行；

其次，免疫实践证明，多糖类抗原大都属于T细胞非依赖性抗原，不能有效激活辅助性T细胞(Th)和T记忆细胞，不能诱导产生免疫记忆功能，免疫保护时间短暂，再次免疫接种不能产生加强免疫反应。而现行流脑疫苗恰恰为多糖类疫苗，其免疫原性差，刺激机体产生免疫应答的效率低下甚至会产生异常应答。

资料显示，脑膜炎球菌多糖抗原虽能诱导产生IgM和IgG抗体，但人类所产生的IgG主要是IgG2亚类，而人血清IgG2亚类抗体出现较迟，一般到8-12岁才能上升至成人水平，故而婴幼儿接种该多糖疫苗后，产生的抗体以具有短暂作用的IgM抗体为主，这就导致了流脑疫苗尤其对两岁以下的婴幼儿保护能力弱、保护周期短的问题。

因此，一方面加强推广接种流脑疫苗，另一方面提高流脑疫苗免疫原性即增强其保护效果对预防和控制流脑发病及流行有重要意义。

另外，目前按照国家接种流脑疫苗免疫程序的规定，完整接种该疫苗共需接种4剂，第1、2剂为基础免疫，第3、4剂次为加强免疫，儿童自6月龄接种第1剂，2剂次间隔不少于3个月，3岁时接种第3剂，与第2剂间隔时间不少于1年；6岁时接种第4剂，与第3剂接种间隔不少于3年。

不难看出，现有免疫程序较其他疫苗接种繁琐和复杂，具有接种次数多和流动儿童疫苗漏接率高的缺点，直接影响到疫苗的免疫效果。

针对以上流脑疫苗免疫原性差、接种繁琐等实际问题，如果我们能够研发出更好的可以增强现有疫苗的免疫原性，诱导高水平的特异性保护抗体的策略 和技术方法，就有希望可以解决现有流脑疫苗尤其对婴幼儿的低免疫原性、诱导免疫记忆、免疫应答能力弱和仅有短期保护作用等问题。

国外最新研究表明多糖与蛋白质结合成为结合疫苗可以部分改善多糖疫苗的缺陷。参考B型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗研发成功的经验，各国学者均在积极探索用相似的方式改进流脑疫苗的保护效果、减少接种不良反应。