[发明专利]一种硝酸还原酶测定试剂盒与应用

权利要求书

1.一种硝酸还原酶测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括了以下液体：

A液：用1％(V/V)的1-丙醇1L作溶剂溶解31.2gNaH₂PO₄配制0.2MNaH₂PO₄溶液；

B液：用1％(V/V)的1-丙醇1L作溶剂溶解71.6gNa₂HPO₄配成0.2MNa₂HPO₄溶液；

C液：1％(W/V)的对-氨基苯磺酸溶液；

D液：0.2％(W/V)的α-萘胺溶液。

2.一种硝酸还原酶测定试剂盒的应用，其特征在于：所述的应用具体为以下步骤：

步骤一：取A液16mL和B液84mL置于试管中均匀混合，配成pH7.5的提取液；

步骤二：取植物样品0.3-0.5克左右剪碎装入试管，记录样品重量。加入步骤一提取液6mL，抽真空 1-2分钟；

步骤三：从步骤二试管中取出1mL溶液放入洁净试管中。把装有样品的反应试管吹氮气30秒后用锡 纸封住试管口，将该试管放入30-35℃水浴中保温1小时，取反应液1mL放入洁净试管；

步骤四：向步骤三装有样品的试管中加入1mL提取液，再放入30-35℃水浴中保温1小时后，取反应 液1mL放入洁净试管；

步骤五：向步骤四装有样品的试管中加入1mL提取液，放入30-35℃水浴中保温1小时，取反应液1mL 放入洁净试管；

步骤六：向上述获得的4支装有1mL反应液的试管中分别加入去离子水4mL，分别加入C液1mL和D 液1mL，用提取液1mL加入4mL去离子水后分别加入C液1mL和D液1mL作空白对照；

步骤七：分光光度计540nm处波长处测定样品光密度值，取同一时间的最佳光密度值计算硝酸还原酶 活性，单位为：μMNO₂^-g^-1FWh^-1。