[发明专利]一种嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法在审
| 申请号： | 201610046476.8 | 申请日： | 2016-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN105566453A | 公开（公告）日： | 2016-05-11 |
| 发明（设计）人： | 李世超;方华;季春源;朱校适;郭子好 | 申请（专利权）人： | 江苏盐城源耀生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K7/06 | 分类号： | C07K7/06;C07K7/08;C07K14/335;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16 |
| 代理公司： | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人： | 王纪营 |
| 地址： | 224224 江苏省盐城*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 酸乳 杆菌 抗菌 分离 纯化 方法 | ||
1.一种嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，包括步骤如下：（1）嗜酸乳杆菌固体发酵，得到嗜酸乳杆菌发酵产物；（2）将嗜酸乳杆菌发酵产物溶于水后，取上清液分别经过多个不同规格的超滤膜，得到不同分子量的组分；（3）将各个组分的上清液冻干，测量各个组分的抑菌活性；（4）将抑菌活性最好的组分通过凝胶柱层析，得到了高纯度的嗜酸乳杆菌抗菌肽；（5）嗜酸乳杆菌抗菌肽热稳定性测试。
2.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤（1）中的发酵温度为36℃～37℃，厌氧发酵，培养时间为47h～49h。
3.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤（2）中的超滤膜包括陶瓷膜、10000Da超滤膜和1000Da超滤膜，得到四组不同分子量的组分。
4.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤（3）中通过打孔法测抑菌活性。
5.根据权利要求4所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤（3）中采用单层琼脂打孔法，以大肠杆菌k99和金黄色葡萄球菌作为指示菌，根据抑菌圈推断各个组分的抑菌活性。
6.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤（4）中通过SephadexG-50凝胶柱层析，得到了高纯度的嗜酸乳杆菌抗菌肽。
7.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法，其特征在于，所述的步骤（5）中将嗜酸乳杆菌抗菌肽经过40℃、70℃、100℃、121℃四个温度处理，测量各个温度阶段的嗜酸乳杆菌抗菌肽的抑菌活性变化。
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