[发明专利]一种嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法在审
申请号: | 201610046476.8 | 申请日: | 2016-01-25 |
公开(公告)号: | CN105566453A | 公开(公告)日: | 2016-05-11 |
发明(设计)人: | 李世超;方华;季春源;朱校适;郭子好 | 申请(专利权)人: | 江苏盐城源耀生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K7/08;C07K14/335;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16 |
代理公司: | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人: | 王纪营 |
地址: | 224224 江苏省盐城*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酸乳 杆菌 抗菌 分离 纯化 方法 | ||
1.一种嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,包括步骤如下:(1)嗜酸乳杆菌固体发酵,得到嗜酸乳杆菌发酵产物;(2)将嗜酸乳杆菌发酵产物溶于水后,取上清液分别经过多个不同规格的超滤膜,得到不同分子量的组分;(3)将各个组分的上清液冻干,测量各个组分的抑菌活性;(4)将抑菌活性最好的组分通过凝胶柱层析,得到了高纯度的嗜酸乳杆菌抗菌肽;(5)嗜酸乳杆菌抗菌肽热稳定性测试。
2.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(1)中的发酵温度为36℃~37℃,厌氧发酵,培养时间为47h~49h。
3.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(2)中的超滤膜包括陶瓷膜、10000Da超滤膜和1000Da超滤膜,得到四组不同分子量的组分。
4.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(3)中通过打孔法测抑菌活性。
5.根据权利要求4所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(3)中采用单层琼脂打孔法,以大肠杆菌k99和金黄色葡萄球菌作为指示菌,根据抑菌圈推断各个组分的抑菌活性。
6.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,所述步骤(4)中通过SephadexG-50凝胶柱层析,得到了高纯度的嗜酸乳杆菌抗菌肽。
7.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌抗菌肽的分离纯化方法,其特征在于,所述的步骤(5)中将嗜酸乳杆菌抗菌肽经过40℃、70℃、100℃、121℃四个温度处理,测量各个温度阶段的嗜酸乳杆菌抗菌肽的抑菌活性变化。
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