[发明专利]一种制备构树人工种子的方法及其专用培养液

说明书

本发明公开了一种本发明的目的是提供一种制备构树人工种子的方法及其专用培养液。本发明首先提供了一种制备构树人工种子的方法，包括如下步骤：(a1)在培养液丁中孵育构树体细胞胚；培养液丁的制备方法：每升1/10MS培养基中加入1.8‑2.2mg 6‑BA、0.9‑1.1mg NAA、18‑22g蔗糖、0.9‑1.1g低分子量壳聚糖、0.9‑1.1g草酸和36‑44g海藻酸钠；(a2)将步骤(a1)得到的体系加入0.9‑1.1g/100mL CaCl2水溶液中，孵育，得到构树人工种子。本发明还保护一种制备构树人工种子的培养液，为所述培养液丁。本发明可以实现构树种苗的高效繁育，满足构树种苗的市场需求，具有重大的推广价值。

技术领域

本发明涉及一种制备构树人工种子的方法及其专用培养液。

背景技术

构树又称楮树，Broussoneti Papyrifera(L)Vent，属桑科植物的落叶乔木，各种类型的土壤几乎都能生长，极少病虫害，耐干冷，耐湿热，根系发达，是保护生态环境和水土保持的一种优良树种。构树的树冠较大，对空气中汽车尾气和其它类型的霾尘等吸附能力较强，因此还是环境绿化及行道树的常用树种。构树全身都能利用：树皮纤维洁白、细长，是制造铜版纸等高档纸的原料和纺织原料，价值高，市场需求量大；树杆是生产纸张、纤维板的好原料；树叶含有丰富的粗蛋白、氨基酸、微量元素，是制备优质青储饲料的原料；树叶中含有黄酮等活性成分，具有降糖和血脂的用途。采用高密度栽培技术种植构树，亩产韧皮纤维200公斤，树杆1500公斤，优质饲料树叶1500公斤。目前，环境绿化造林和经济农业等对于构树种苗的需求非常大，每年将达到2000万株。

目前构树的种苗制备主要靠扦插和组培苗供应。扦插存在着季节性、场地占用面积大、效率低、劳动强度大等问题。常规组培方法存在着人工成本高、劳动量大、成本高等问题。因此，采用效率更高、成本更低、劳动量更小的生物技术进行构树种苗的快速繁殖与生产具有重要的实际意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备构树人工种子的方法及其专用培养液。

本发明首先提供了一种制备构树人工种子的方法，包括如下步骤：

(a1)在培养液丁中孵育构树体细胞胚；

培养液丁的制备方法：每升1/10MS培养基中加入1.8-2.2mg 6-BA、0.9-1.1mgNAA、18-22g蔗糖、0.9-1.1g低分子量壳聚糖、0.9-1.1g草酸和36-44g海藻酸钠；

(a2)将步骤(a1)得到的体系加入0.9-1.1g/100mL CaCl2水溶液中，孵育，得到构树人工种子。

所述步骤(a1)中，所述孵育的条件为：室温静置孵育3分钟。

所述步骤(a2)中，所述孵育的条件为：室温静置孵育30分钟。

所述培养液丁的制备方法具体可：每升1/10MS培养基中加入2mg 6-BA、1mg NAA、20g蔗糖、1g低分子量壳聚糖、1g草酸和40g海藻酸钠。

所述培养液丁的pH具体可为6.0。

所述CaCl2水溶液具体可为1g/100mL CaCl2水溶液。

所述制备构树人工种子的方法中，所述构树体细胞胚、所述培养液丁和所述CaCl2水溶液的配比如下：1.5×104个构树体细胞胚：1500mL培养液丁：3000mL CaCl2水溶液。

所述步骤(a2)中，还包括如下步骤：进行所述孵育后，弃上清并用无菌去离子水冲洗。