[发明专利]利用免疫层析法的变应原检测方法有效
申请号: | 201610040264.9 | 申请日: | 2010-02-23 |
公开(公告)号: | CN105651994B | 公开(公告)日: | 2019-03-08 |
发明(设计)人: | 加藤重城;秋元政信 | 申请(专利权)人: | 普利玛火腿株式会社 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/577 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 杜艳玲;石克虎 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 免疫 层析 变应原 检测 方法 | ||
1.利用免疫层析法的变应原的检测方法,其为使用将胶体金结合于抗变性和未变性的变应原的单克隆抗体的胶体金标记抗体、在规定位置固定有与上述胶体金标记抗体识别不同的抗原决定簇的抗变性和未变性的变应原的单克隆抗体的展开支持体、和含有不使用2-巯基乙醇并使用十二烷基硫酸钠和非离子型表面活性剂而从含有变应原的食品被测试样中提取的变性和未变性的变应原的测定样品的展开液,在展开支持体上展开,然后根据有无胶体金的聚集来检测变应原的免疫层析法,其特征在于,使用含有胎牛血清(FBS)至少10重量%的展开液。
2.权利要求1所述的利用免疫层析法的变应原的检测方法,其特征在于,使用含有胎牛血清(FBS)至少30重量%的展开液。
3.权利要求2所述的利用免疫层析法的变应原的检测方法,其特征在于,使用含有胎牛血清(FBS)至少50重量%的展开液。
4.权利要求1~3中任一项所述的利用免疫层析法的变应原的检测方法,其特征在于,抗变性和未变性的变应原的单克隆抗体为特异性地识别选自作为乳变应原的主要成分的αs1酪蛋白、作为乳清变应原的主要成分的β乳球蛋白、作为卵白变应原的卵白蛋白和卵类粘蛋白、作为小麦变应原的主要成分的麸蛋白、作为荞麦的主要蛋白质的分子量24kDa和76kDa的蛋白质、作为花生的主要蛋白质的Arah1中的变性和未变性的变应原的2种单克隆抗体。
5.权利要求1~3中任一项所述的利用免疫层析法的变应原的检测方法,其特征在于,使用Tween20作为非离子型表面活性剂。
6.免疫层析用变应原的检测试剂盒,其特征在于,具备:担载有将胶体金结合于抗变性和未变性的变应原的单克隆抗体的胶体金标记抗体的胶体金标记抗体担载体、在规定位置固定有与上述胶体金标记抗体识别不同的抗原决定簇的抗变性和未变性的变应原的单克隆抗体的展开支持体、含有用于不使用2-巯基乙醇从含有变应原的食品被测试样中提取变性和未变性的变应原的十二烷基硫酸钠和非离子型表面活性剂的缓冲液、可担载使用十二烷基硫酸钠和非离子型表面活性剂而从含有变应原的食品被测试样中提取的变性和未变性的变应原的测定样品的样品用载体、以及胎牛血清(FBS)或含有胎牛血清(FBS)的展开液。
7.权利要求6所述的免疫层析用变应原的检测试剂盒,其特征在于,抗变性和未变性的变应原的单克隆抗体为特异性地识别选自作为乳变应原的主要成分的αs1酪蛋白、作为乳清变应原的主要成分的β乳球蛋白、作为卵白变应原的卵白蛋白和卵类粘蛋白、作为小麦变应原的主要成分的麸蛋白、作为荞麦的主要蛋白质的分子量24kDa和76kDa的蛋白质、作为花生的主要蛋白质的Arah1中的变性和未变性的变应原的2种单克隆抗体。
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