[发明专利]组培苗蔗糖利用率的测定方法

权利要求书

1.组培苗蔗糖利用率的测定方法，其特征在于：包含以下步骤：

第一，培养瓶采用完全透气的封口膜封口，分别用C3植物蔗糖和甘蔗蔗糖作为有机碳源配制C3植物蔗糖培养基和C4植物蔗糖培养基；

第二，测定上述C3植物蔗糖和C4植物蔗糖的δ¹³C值，C3植物蔗糖的δ¹³C值记为δ_T，C4植物蔗糖的δ¹³C值记为δ_G；

第三，选取长势一致的组培苗，记录它们的鲜重M₀，分别接种到C4植物蔗糖培养基和C3植物蔗糖培养基，培养至鲜重增重超20倍后，结束培养；

第四，同期，一方面将待测植物的组培苗分别培养在无CO₂的C3植物蔗糖培养基和C4植物蔗糖培养基中；另一方面利用pH为5.5的营养液在待测环境中对长有2片展开叶的待测植物进行溶液培养；

第五，分别获取培养前C4植物蔗糖和C3植物蔗糖培养基的蔗糖浓度c₀和体积V₀，培养结束后培养基的C4植物蔗糖和C3植物蔗糖浓度c和体积V，根据蔗糖浓度和体积的变化的计算出蔗糖的消耗

第六，测定培养结束后的组培苗鲜重M；计算出组培苗的增重为B＝M-M₀；

第七，获取培养结束后的用C4植物蔗糖培养基和C3植物蔗糖培养基培养的组培苗新生叶片的δ¹³C值δ_G1和δ_T1；

第八，获取培养结束后的在无CO₂的C3植物蔗糖培养基和C4植物蔗糖培养基中培养的组培苗新生叶片的δ¹³C值δ_G0和δ_T0；

第九，获取培养结束后在溶液培养中的待测植物新生叶片δ¹³C值δair；

第十，测定培养期间的待测培养环境中空气中的二氧化碳δ¹³C值δa；

第十一，依据δ_G0和δ_T0以及δ_T和δ_G计算出待测植物的组培苗利用C4

植物蔗糖和C3植物蔗糖产生碳同位素分馏值ΔG和ΔT；

第十二，依据δair和δa计算出待测植物利用空气二氧化碳的分馏值Δ_air；

第十三，将上述所得数据，δ_T、δ_G、Δ_G、Δ_T、Δ_air、δ_G1、δ_T1、δ_air代入方程：计算出异养份额f_b；

第十四，根据上述计算得到的f_b，结合组培苗的增重B和蔗糖消耗C，其中C＝c₀×v₀-c×V，计算组培苗蔗糖利用率A；

在第十一步骤中，Δ_G＝δ_G－δ_G0，Δ_T＝δ_T－δ_T0；

在第十二步骤中，Δ_air＝δ_a－δ_air；在第十四步骤中，蔗糖利用率A的计算公式为：f_b×B＝A×C，即A＝f_b×B/C。