[发明专利]一种工业化高产快速生产黄杆菌的方法

权利要求书

1.一种工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)菌种培养：将黄杆菌(Flavobacteriummizutaii)菌株接种至含糖量2～6％的培养液中，然后在温度为28～37℃条件下培养至细胞数为20～60亿/ml，得种子培养液；

(2)发酵罐种子培养：将步骤(1)所得种子培养液接种至培养液含糖量为2～6％的发酵罐中，按通气量为6～14m³/h通入无菌空气，在温度为28～37℃条件下培养至细胞数为40～80亿/ml，得发酵罐种子培养液；

(3)将步骤(2)所得发酵罐种子培养液接种至培养液含糖量为4～8％的发酵罐中，先按通气量为16～28m³/h通入无菌空气，在温度为28～37℃条件下发酵6～8小时后，按通气量为28～50m³/h通入无菌空气，继续发酵至细胞数为100-200亿/ml，得黄杆菌菌液。

2.根据权利要求1所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：所述步骤(1)为将黄杆菌按8～12％接种量接种至含糖量3～6％的培养液中，然后在温度为30～35℃、pH为7-7.5条件下培养至细胞数为20～80亿/ml，得种子培养液。

3.根据权利要求1所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述种子培养液按体积比为1:40接种至种子发酵罐中。

4.根据权利要求1所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：所述pH为7.0。

5.根据权利要求1所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：所述培养液含有氮源、磷源、硫酸镁和碳酸钙，各组分质量百分比如下：氮源5-8％，磷源0.1-0.2％，硫酸镁0.1-0.2％，碳酸钙0.1-0.5％。

6.根据权利要求5所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：所述氮源为牛肉汤，蛋白胨，玉米汁，硫酸铵，碳酸氢铵，氨水，尿素，硝酸钾，硝酸钠，硝酸铵，磷酸铵，磷酸氢铵或磷酸氢二铵中的一种或几种；所述磷源为磷酸，磷酸铵，磷酸氢铵，磷酸氢二铵，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾中的一种或几种。

7.根据权利要求6所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：所述牛肉汤的制备方法如下：将牛肉用蒸汽水煮沸30min，然后过滤得牛肉汤；所述玉米液由以下方法制备：将玉米浆干粉用蒸汽水煮沸，过滤得玉米浆液。

8.根据权利要求5所述工业化高产快速生产黄杆菌的方法，其特征在于：所述培养液的加入方式为氮源，碳源，磷源，硫酸镁，碳酸钙随种子发酵罐培养液加入。