[发明专利]澄清硫酸软骨素酶解液的制备方法

权利要求书

1.一种澄清硫酸软骨素酶解液的制备方法，其特征在于：动物鲜软骨加水蒸煮熟化后的蒸煮液，经酶解后，加入动物鲜软骨质量0.01%～1.5%的钙离子源，升温，钙离子使蛋白变性，得到澄清硫酸软骨素酶解液；具体包括以下步骤：

1) 将动物鲜软骨加水至漫过软骨，加热至沸腾后，100℃蒸煮熟化8～24h，除去上层油脂，得蒸煮液；

2)将步骤1)所得蒸煮液降温至45～50℃，加碱液调节pH为8.5～9.0，加入2709碱性蛋白酶，酶解1～4h，再次加碱液调节pH至8.0～8.5，并控制温度为40～45℃，然后加入粉碎的猪胰脏，酶解4h，得粗酶解液；

3) 用盐酸调节步骤2)所得粗酶解液pH为5.5，然后加入动物鲜软骨质量0.01%～1.5%的钙离子源，升温至70～95℃，搅拌0.5h使蛋白变性，然后静置分层取上清液，得澄清硫酸软骨素酶解液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的钙离子源为二水氯化钙、无水氯化钙或硝酸钙。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的钙离子源为二水氯化钙。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于： 步骤1）中动物鲜软骨为牛、羊、鸡、鸭或猪的鲜软骨。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述的2709碱性蛋白酶的加入量为步骤1）动物鲜软骨质量的0.1～1.5‰；所述的猪胰脏的加入量为动物鲜软骨质量的1.5～2.5%；所述的碱液为NaOH水溶液，质量浓度为10～36%。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述的2709碱性蛋白酶的加入量为动物鲜软骨质量的0.8～1‰。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于： 步骤3）中钙离子源加入量为步骤1）动物鲜软骨质量的0.2%。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3）中所述的盐酸浓度为10～35%。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）和3）的操作均在搅拌条件下进行，所述的搅拌转速为30～65r/min。